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古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存

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古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

 

古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒有必要。
Prostaglandin F2α 50 mg     9α,11α,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; Dinoprost|PGF2α; Prostaglandin F2α

Cefoxitin sodium salt 250 mg     Betacef|Cenomycin|Farmoxin|Mefoxin|Merxin 6R,7S-3-[[aminocarbonyloxy]methyl]-7-methoxy-8-oxo-7-[2-thienylacetylamino]-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid, monosodium salt

L-*(25GM     L-Cystine, 56-89-3; MW 236.15; 99%

Clenbuterol hydrochloride 50 mg     4-amino-3,5-dichloro-α-[[1,1-dimethylethylamino]methyl]-benzenemethanol monohydrochloride; NAB 365|Ventipulmin Clenbuterol hydrochloride

7Z-Tricosene 5 mg     7Z-tricosene; 7Z-Tricosene

Spleen Tyrosine Kinase Inhibitor     Syk Inhibitor
TBS-Corey Lactone Aldehyde 5 g     [3aR-3aa4a,5b,6aa]-5-tert-butyl-dimethylsilylhexahydro-2-oxo-2H-cyclopenta[b]furan-4-carboxaldehyde; TBS-Corey Lactone Aldehyde

*標(biāo)記二甲基化組蛋白H3K27多肽     Biotinylated Dimethyl Histone H3K27 Peptide 200 ul

FTY720 phenoxy-biotin 5 mg     2-amino-2-[2-4-octylphenylethyl]-1,3-propanediol-N-biotinoyl-1,5-diampentane FTY720 phenoxy-biotin

3,4-EDMA hydrochloride 50 mg     3,4-Ethylenedioxy-N-methylamphetamine; 1-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]dioxin-6-yl-N-methylpropan-2-amine, monohydrochloride

LE 135 1 mg     4-78,9,10-tetrahydro-57,710,10-pentamethyl-5H-benzo[e]naphtho[2,3-b][1,4]diazepin-13-yl-benzoic acid; LE 135

PtdIns--4)-P1 -1,2-dihexanoyl) -sodium salt) (5 mg)     DHPI-4-P1|Phosphatidylinositol-4-phosphate C-6, PtdIns--4)-P1 -1,2-dihexanoyl) -sodium salt), 1-(1,2-dihexanoylphosphatidyl)inositol-4-phosphate, disodium salt
Prostaglandin E2 Express EIA Monoclonal Antibody 100 dtn     PGE2 EIA Express Antiserum Prostaglandin E2 Express EIA Monoclonal Antibody

5-Azidopentanoic Acid 500 mg     5-Azidovaleric acid|Click Tag

Texas Red疊氮化物     Texas Red azide

R-Butaprost 10 mg     9-oxo-11。alpha。,16R-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid, metxyl ester 15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester|TR 4978|(±)-15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester; R-Butaprost

Arachidonoyl 2-Chloroetxylamide 25 mg     N-2-chloroetxyl-5Z,8Z11Z,14Z-eicosatetraenamide ACEA|2-chloro-AEA; Arachidonoyl 2-Chloroetxylamide

N-1-((cyanometxylcarbamoylcyclohexyl-4-4-propylpiperazin-1-ylbenzamide; AAE581     Balicatib
匹克氏肉湯基礎(chǔ)B250g用于溶血性鏈球菌選擇性增菌培養(yǎng)。

亞鹽-多粘菌素-*瓊脂基礎(chǔ) Sulfite-Polymyxin-Sulphadiazine Agar Base 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))

LST肉湯 LST Broth 250 各種食品中大腸菌群近似值(MPN)測(cè)定

營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖,可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖,可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用(GB標(biāo)準(zhǔn))

*鹽瓊脂 250g 用于*
Brain-HeartBaptistextractionliquidmedium

雙料乳糖膽鹽(含中和劑)培養(yǎng)基 Double Lactose Bile Medium 用于化妝品中糞大腸菌群的測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))

SE增菌液 Selenite Enrichment Medium 250 增殖標(biāo)本中的沙門氏菌

亞碲酸鹽卵黃增菌液5ml*Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)中incubationmedia亞碲酸鹽卵黃增菌液5ml*Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)中

WSSalmonellaAgar
古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基2406g滅菌后冷至45℃左右時(shí)加入5%脫纖維羊血,用于空腸彎曲菌的培養(yǎng)。(CPGB、EPUSP)

4651 CM 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 4651 CM 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml

紫晶口磨 提高酒的含酯量,生香味 /

BETA-SSA瓊脂250g用于鏈球菌的選擇性分離培養(yǎng)

Cary-Blair氏*(不含瓊脂) 250g 用于運(yùn)送腸道致病菌。

古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合

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