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真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次運輸

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更新時間:2017-07-18 12:16:36瀏覽次數(shù):199次

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真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次運輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

 

真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次運輸產(chǎn)品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次運輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
15R),19R-hydroxy Prostaglandin F1α 100 ug     9。alpha。,11。alpha。,15R,19R-tetrahydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 15R),19R-hydroxy PGF1α; 15R),19R-hydroxy Prostaglandin F1α

7-methyl Guanosine 50 mg     7-

*(維生素H)(25GM     D-Biotin, 58-85-5; MW 244.31; Cell Culture Tested

Zoledronic Acid hydrate 50 mg     PP-[1-hydroxy-2-1H-imidazol-1-ylethylidene]bis-phosphonic acid, monohydrate; Zoledronic Acid hydrate

8-methyl Nonanoic Acid 100 mg     8-methyl Nonanoic Acid; Isocapric Acid 8-methyl Nonanoic Acid

G3335; H-Trp-Glu-OH     PPARγ Antagonist G3335
FAAH human recombinant Assay Reagent 1 ea     FAAH human recombinant); FAAH human recombinant Assay Reagent

*標(biāo)記單甲基化組蛋白H3K27多肽     Biotinylated Monomethyl Histone H3K27 Peptide 100 ul

DEPMPO-biotin 25 ug     N-[3-[[5-[3aS,4S,6aR-hexahydro-2-oxo-1H-thieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-1-oxopentyl]amino]propyl]-[2S,3R-2-diethoxyphosphinyl-3,4-dihydro-2-methyl-1-oxido-2H-pyrrol-3-yl]methyl ester-carbamic acid; DEPMPO-biotin

Benzydamine 1 mg     N,N-dimethyl-3-[[1-phenylmethyl-1H-indazol-3-yl]oxy]-1-propanamine

HA-1100 hydrochloride 25 mg     5-[hexahydro-1H-14-diazepin-1-ylsulfonyl]-12H-isoquinolinone, monohydrochloride; Hydroxyfasudil; HA-1100 hydrochloride

Arachidonic Acid-biotin (5 mg)     Arachidonic Acid-biotin, 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoyl-N’-biotinoyl-1,5-diaminopentane
384-Well Solid Plate low volume black 5 ea     384-Well Solid Plate low volume; black

BRD32048 1 mg     N2-4-metxoxypxenyl-6-1-piperidinylmetxyl-1,3,5-triezine-2,4-diamine

yenine 55 [相當(dāng)于Cy5。5]     yenine 5。5 amine [equivalent to Cy5。5 amine]

Butaprost free acid 500 ug     9-oxo-11alpha。,16S-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid 15-deoxy-16S-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1|(±)-15-deoxy-16S-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1; Butaprost free acid

Arachidonoyl Cyclopropylamide 10 mg     N-cyclopropyl-5Z8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACPA Arachidonoyl Cyclopropylamide

4-5H-Dibenzo[a,d]cyclohepten-5-ylidene-1-[4-2H-tetrazol-5-ylbutyl]-pipeni7ine     AT 56
明膠磷酸鹽緩沖液250g用于檢測肉毒梭菌時樣品稀釋液

亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ) Sodium lurite Broth Base 用于*的增菌培養(yǎng)。每100ml培養(yǎng)基需另加入1%亞碲酸鈉1ml

發(fā)酵蛋白胨 250

卵黃瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于梭菌的分離培養(yǎng),每培養(yǎng)基中添加22incubationmedia卵黃瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于梭菌的分離培養(yǎng),每培養(yǎng)基中添加221001

MethylRedVogesProskauerBroth
ISP培養(yǎng)基250g用于鏈霉菌的培養(yǎng)

BactoTM瓊脂 優(yōu)化有益的鈣鎂離子比例同時減少有害離子含量 454g incubation media BactoTM瓊脂 優(yōu)化有益的鈣鎂離子比例同時減少有害離子含量 454g

頂青霉 耐高溫* /

亞鉍瓊脂平板(9cm)用于沙門氏菌的選擇性分離

WORT瓊脂 250g 用于真菌,特別是酵母菌的計數(shù)和增菌培養(yǎng)
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次運輸BM液體培養(yǎng)基250g用于醋酸鈣不動桿菌增菌培養(yǎng)

50023 BR 10 kg incubation media 50023 BR 10 kg

構(gòu)巢裸胞殼 /

LBBroth(Lennox)

DTM添加劑2 1ml*5 每支添加于200ml DTM培養(yǎng)基中

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