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植物種屬鑒定 PCR Mix 8100 次保存

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更新時(shí)間:2017-07-17 14:25:47瀏覽次數(shù):125次

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植物種屬鑒定 PCR Mix 8100 次保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

植物種屬鑒定 PCR Mix 8100 次保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
植物種屬鑒定 PCR Mix 8100 次保存變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
植物種屬鑒定 PCR Mix 8100 次保存DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒有必要。
植物種屬鑒定 PCR Mix 8100 次保存使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
17,20-dimethyl Prostaglandin F1α 10 mg     9alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-17S,20-dimethyl-prost-13E-en-1-oic acid 17,20-dimethyl PGF1α; 17,20-dimethyl Prostaglandin F1α

Alprenolol hydrochloride 100 mg     H 56/28; 1-[1-methylethylamino]-3-[2-2-propen-1-ylphenoxy]-2-propanol, monohydrochloride

流*(5GM     Kanamycin Sulfate, Number 25389-94-0 Formula: C18H36N4O11

Probenecid 100 g     4-[dipropylaminosulfonyl]-benzoic acid; Benemid|NSC 18786|Tubophan|Uricosid; Probenecid

13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin E1-d4 25 ug     9,15-dioxo-11。alpha。-hydroxy-prostan-1-oic-3,3,44-d4 acid; 1314-dh-15-k PGE1-d4; 1314-dihydro-15-keto Prostaglandin E1-d4

Q-DOMe-EOMe-VDOMe-OPh     EZSolution Q-DEVD-OPh
SIRT6 Direct Assay Buffer 10X 1 ea     SIRT6 Direct Assay Buffer 10X

*基化組蛋白H3K79多肽     Trimethyl Histone H3K79 Peptide 200 ul

YM-58483 10 mg     N-[4-[3,5-bistrifluoromethyl-1H-pyrazol-1-yl]phenyl]-4-methyl-1,23-thiadiazole-5-carboxamide; BTP 2; YM-58483

Indinavir sulfate 500 mg     Crixivan|L-735,524|MK 639 2,3,5-trideoxy-N-[1S,2R-2,3-dihydro-2-hydroxy-1H-inden-1-yl]-5-[2S-2-[[1,1-dimethylethylamino]carbonyl]-4-3-D-erythro-pentonamide, monosulfate

Amiloride hydrochloride 1 g     3,5-diamino-N-aminoiminomethyl-6-chloro-2-pyrezinecarboxamide monohydrochloride; MK 87Amiloride hydrochloride

20-HETE Lipid Maps MS Standard (500 ug)     2-hydroxy Arachidonic Acid, 20-HETE Lipid Maps MS Standard, 2-hydroxy-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid
Tris Buffer Concentrate 10X 10 mL     Tris Buffer Concentrate 10X

Isorhamnetin 25 mg     3-O-metxyl Quercetin; 3,

yenine 7馬來酰亞胺 [相當(dāng)于Cy7馬來酰亞胺]     yenine 7 maleimide [equivalent to Cy7 maleimide]

Linezolid 100 mg     N-[[5S-3-[3-fluoro-4-4-morpholinylpxenyl]-2-oxo-5-oxazolidinyl]metxyl]-acetamide; PNU 100766|Zyvox ; Linezolid

O-11 1 mg     10-propoxy-decanoic acid 11-Oxatetradecanoic Acid; O-11

Nordixy7noguaiaretic Acid 4,4-2,3-dimetxyl-1,4-butanediylbis-1,2-benzenediol     NDGA
高鹽度腦心浸液肉湯2ml*20支用于細(xì)菌增菌培養(yǎng)

溴棕*銨瓊脂 選擇分離和鑒別銅綠假單胞菌 500g incubation media 溴棕*銨瓊脂 選擇分離和鑒別銅綠假單胞菌 500g

串珠鐮孢 油漆腐蝕菌 /

品紅亞鈉瓊脂(即用型)/瓶用于飲用水,水源水中總大腸菌群的選擇性分離和確證

GetrimideAgarMedium
M250g用于細(xì)菌培養(yǎng)。

"*(50mg/ml) incubation media "*(50mg/ml)

黑根霉 /

血平皿(9cm)用于一般細(xì)菌的分離、培養(yǎng)和溶血試驗(yàn)

PotatoDextroseAgar
植物種屬鑒定 PCR Mix 8100 次保存NTM培養(yǎng)基250g用于淋球菌的分離培養(yǎng)(Quelab方法)

50094 BR 10Kg incubation media 50094 BR 10Kg

茯苓 食用 /

Amies*管20/包用于致病菌標(biāo)本的運(yùn)送保存

YM培養(yǎng)基 250g 用于霉菌和酵母菌的增菌培養(yǎng)

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