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植物種屬鑒定 PCR Mix 7100 次運(yùn)輸

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更新時(shí)間:2017-07-17 14:25:25瀏覽次數(shù):102次

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植物種屬鑒定 PCR Mix 7100 次運(yùn)輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

植物種屬鑒定 PCR Mix 7100 次運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
植物種屬鑒定 PCR Mix 7100 次運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
植物種屬鑒定 PCR Mix 7100 次運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時(shí)間退火沒有必要。
植物種屬鑒定 PCR Mix 7100 次運(yùn)輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
17,20-dimethyl Prostaglandin F1α 1 mg     9alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-17S,20-dimethyl-prost-13E-en-1-oic acid 17,20-dimethyl PGF1α; 17,20-dimethyl Prostaglandin F1α

L-Norpweu7oepxe7nine 50 mg     --Norpweu7oepxe7nine; (αR-α-[1R-1-aminoethyl]-benzenemethanol

L-賴氨酸鹽酸鹽(25GM     L-Lysine Hydrochloride, 62005-4-4 MW 182.65; USP

Probenecid 10 g     4-[dipropylaminosulfonyl]-benzoic acid Benemid|NSC 18786|Tubophan|Uricosid; Probenecid

1314-dihydro Prostaglandin E1-d4 50 ug     9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-prostan-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; Prostaglandin E0-D4|13,14-dh PGE1-d4 13,14-dihydro Prostaglandin E1-d4

OA     Okadaic acid
SIRT2 Direct Fluorophore 1 ea     SIRT2 Direct Fluorophore

單甲基化組蛋白H3K9多肽     Monomethyl Histone H3K9 Peptide 100 ul

YM-58483 1 mg     N-[4-[3,5-bistrifluoromethyl-1H-pyrazol-1-yl]phenyl]-4-methyl-1,2,3-thiadiazole-5-carboxamide; BTP 2; YM-58483

Indinavir sulfate 1 g     Crixivan|L-735,524|MK 639; 2,3,5-trideoxy-N-[1S,2R-2,3-dihydro-2-hydroxy-1H-inden-1-yl]-5-[2S-2-[[1,1-dimethylethylamino]carbonyl]-4-3-D-erythro-pentonamide, monosulfate

Bucladesine sodium salt 50 mg     N-1-oxobutyl-cyclic 3’,5-hydrogen phosphate 2-butanoate-adenosine, monosodium salt DC 2797; Bucladesine sodium salt

12-S)-HETE Lipid Maps MS Standard (250 ug)     12-S)-HETE Lipid Maps MS Standard, 12S-hydroxy-5Z,8Z,1E,14Z-eicosatetraenoic acid
TMB Substrate Solution 12 ml     TMB Substrate Solution

Isorhamnetin 10 mg     3-O-metxyl Quercetin; 3,

yenine 7,單琥珀酰亞胺脂 [相當(dāng)于Cy7 NHS]     yenine 7, monosuccinimidyl ester [equivalent to Cy7 NHS ester]

Finasteride 50 mg     4aR,4bS6aS7S,9aS9bS,11aR-N-1,1-dimetxyletxyl-24a,4b,56,6a,7,89,9a,9b,10,11,11a-tetradecaxy7no-4a,6a-dimetxyl-2-oxo-1H-indeno[5,4-f]inoneoline-7-carboxamide; MK 906|Propecia |Proscar ; Finasteride

3-Thiatetradecanoic Acid 5 mg     undecylthio-acetic acid 3-TDA; 3-Thiatetradecanoic Acid

Nordixy7noguaiaretic Acid 4,4-2,3-dimetxyl-1,4-butanediylbis-1,2-benzenediol     NDGA
天然礦泉水檢驗(yàn)培養(yǎng)基

溴甲酚紫葡萄糖肉湯 Bromcresol Purple Dextrose Broth 用于低酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)

菌種培養(yǎng)基 Strain Medium(For B.Cerus) 250 四環(huán)素檢測中蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)

葡萄糖瓊脂250用于細(xì)菌的綜合生化試驗(yàn)incubationmedia葡萄糖瓊脂250用于細(xì)菌的綜合生化試驗(yàn)

BeisachangSodiumluriteBrothBase
精酸雙水解酶(綠膿桿菌)20支綠膿桿菌用

液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FTM) 無菌實(shí)驗(yàn)的厭氧菌和需氧菌培養(yǎng) 100mL*25 incubation media 液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FTM) 無菌實(shí)驗(yàn)的厭氧菌和需氧菌培養(yǎng) 100mL*25

單增李斯特菌 產(chǎn)乳酸和延胡索酸 /

血平皿(9cm)用于一般細(xì)菌的分離、培養(yǎng)和溶血試驗(yàn)

高鹽察氏瓊脂 250g 用于霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))
植物種屬鑒定 PCR Mix 7100 次運(yùn)輸水稻赤霉菌培養(yǎng)基250g用于水稻中赤霉菌培養(yǎng)

500ml incubation media 500ml

寬圓羊肚菌 模式菌株 /

磷酸鹽緩沖液(PBSpH7.2)9ml*20/包用于菌落總數(shù),大腸菌群,金葡菌,大腸桿菌樣品制備

沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于真菌的培養(yǎng)

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