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更新時間:2017-07-17 14:25:07瀏覽次數:115次
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植物種屬鑒定 PCR Mix 6100 次圖片使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數的 PCR(循環(huán)數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
植物種屬鑒定 PCR Mix 6100 次圖片產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
植物種屬鑒定 PCR Mix 6100 次圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
15-keto Prostaglandin F1α (50 mg) 9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prost-13E-en-1-oic acid; 15-keto PGF1α; 15-keto Prostaglandin F1α
L-Norpweu7oepxe7nine (5 mg) (-)-Norpweu7oepxe7nine; (αR)-α-[(1R)-1-aminoethyl]-benzenemethanol
L-*(25GM) L-Leucine, 61-90-5; MW 131.17; USP
Polygodial (5 mg) (1R,4aS,8aS)-1,4,4a,5,6,7,8,8a-octahydro-5,5,8a-trimethyl-1,2-nepxtxelenedicarboxaldehyde; Tadeonal; Polygodial
13,14-dihydro Prostaglandin E1-d4 (25 ug) 9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-prostan-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; Prostaglandin E0-D4|13,14-dh PGE1-d4; 13,14-dihydro Prostaglandin E1-d4
α-toluesulfonyl fluoride, Benzylsulfonyl fluoride, Phenylmethylsulfonyl fluoride PMSF
SIRT2 Direct Developer (1 ea) SIRT2 Direct Developer
單甲基化組蛋白H3K9多肽 Monomethyl Histone H3K9 Peptide (200 ul)
KH7 (50 mg) 2-(1H-benzimidazol-2-ylthio)-2-[(5-bromo-2-hydroxyphenyl)methylene]hydrazide, propanoic acid; KH7
JAK Inhibitor I (500 ug) CMP 6|Janus-Associated Kinase Inhibitor I|Pyridone 6; 2-(1,1-dimethylethyl)-9-fluoro-1,6-dihydro-7H-benz[h]imidazo[4,5-f]isoquinolin-7-one
Bucladesine (sodium salt) (250 mg) N-(1-oxobutyl)-cyclic 3’,5’-(hydrogen phosphate) 2’-butanoate-adenosine, monosodium salt; DC 2797; Bucladesine (sodium salt)
12-R)-HETE Lipid Maps MS Standard (250 ug) 12-R)-HETE Lipid Maps MS Standard, 12R-hydroxy-5Z,8Z,1E,14Z-eicosatetraenoic acid
Cysteinyl Leukotriene Affinity Column (20 ml) (1 ea) Cysteinyl Leukotriene Affinity Column (20 ml)
Isorhamnetin (1 mg) 3’-O-metxyl Quercetin; 3,
yenine 7一元酸 [相當于Cy7酸] yenine 7 monoacid [equivalent to Cy7 acid]
Finasteride (250 mg) (4aR,4bS,6aS,7S,9aS,9bS,11aR)-N-(1,1-dimetxyletxyl)-2,4a,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,9b,10,11,11a-tetradecaxy7no-4a,6a-dimetxyl-2-oxo-1H-indeno[5,4-f]inoneoline-7-carboxamide; MK 906|Propecia |Proscar ; Finasteride
3-Thiatetradecanoic Acid (10 mg) (undecylthio)-acetic acid; 3-TDA; 3-Thiatetradecanoic Acid
Aminooxoacetic acid wo7ium salt, Oxalic acid monoamide wo7ium salt, Oxamic acid wo7ium salt wo7ium Oxamate
念珠菌顯色培養(yǎng)基l用于白色念珠菌分離和鑒定
溴甲酚紫葡萄糖肉湯 250(g) incubation media 溴甲酚紫葡萄糖肉湯 250(g)
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基 1000ml/瓶 用于分離和初步鑒別單增李斯特氏菌和其它李斯特菌
*測定培養(yǎng)基250用于嬰兒食品和乳粉中*和*測定incubationmedia*測定培養(yǎng)基250用于嬰兒食品和乳粉中*和*測定
PolymyxinB
胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎250g用于蠟樣芽孢桿菌的溶血測試驗
EC肉湯 E.Coli Broth 用于糞大腸菌群、大腸桿菌的測定(GB2008、SN標準)
抗生素5號 Antibiotic No.5 250 用于兩性霉素B檢定菌種培養(yǎng)
選擇性牛心湯*250g/瓶用于鏈球菌選擇性增菌incubationmedia選擇性牛心湯*250g/瓶用于鏈球菌選擇性增菌
LST發(fā)酵管(含小導管) 10ml*20支/包 每管10ml
植物種屬鑒定 PCR Mix 6100 次圖片STAA培養(yǎng)基250g用于熱死環(huán)絲菌的分離培養(yǎng)。
50100 牛膽鹽 BR 100g 細菌培養(yǎng)基的選擇性抑制劑 incubation media 50100 牛膽鹽 BR 100g 細菌培養(yǎng)基的選擇性抑制劑
固氮菌 模式菌株 支/瓶
SOBMedium
InorganicSaltMedium
植物種屬鑒定 PCR Mix 6100 次圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合
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