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植物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存

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更新時間:2017-07-17 14:24:19瀏覽次數(shù):115次

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植物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

植物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存產(chǎn)品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
植物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
植物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
植物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
15-keto Prostaglandin F1α 10 mg     9alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prost-13E-en-1-oic acid 15-keto PGF1α; 15-keto Prostaglandin F1α

MF498 5 mg     N-[[[4-5,9-diethoxy-6,8-dihydro-6-oxo-7H-pyrrolo[3,4-g]quinolin-7-yl-3-methylphenyl]methyl]sulfonyl]-2-methoxy-benzeneacetamide

MES緩沖液(1KG     MES Buffer 4432-31-9; 99%

Polygodial 10 mg     1R4aS,8aS-14,4a,5,6,78,8a-octahydro-5,58a-trimethyl-1,2-nepxtxelenedicarboxaldehyde Tadeonal; Polygodial

5Z),8Z),11Z-Eicosatrienoic Acid methyl ester 10 mg     5Z,8Z,11Z-eicosatrienoic acid methyl ester; Mead Acid methyl ester; 5Z),8Z),11Z-Eicosatrienoic Acid methyl ester

N-Hydroxy-1,3-dioxo-1H-benz[de]isoquinoline-23H-hex*     Scriptaid
SIRT2 Direct NAD+ 1 ea     SIRT2 Direct NAD+

小鼠心臟組織核提取物     Mouse Heart Nuclear Extract 500 ug

KH7 25 mg     2-1H-benzimidazol-2-ylthio-2-[5-bromo-2-hydroxyphenylmethylene]hydrazide propanoic acid; KH7

JAK Inhibitor I 10 mg     CMP 6|Janus-Associated Kinase Inhibitor I|Pyridone 6 2-1,1-dimethylethyl-9-fluoro-1,6-dihydro-7H-benz[h]imidazo[4,5-f]isoquinolin-7-one

Bucladesine sodium salt 100 mg     N-1-oxobutyl-cyclic 3’,5-hydrogen phosphate 2-butanoate-adenosine, monosodium salt; DC 2797; Bucladesine sodium salt

8-S)-HETE Lipid Maps MS Standard (250 ug)     8-S)-HETE Lipid Maps MS Standard, 8S-hydroxy-5Z,9E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid
Wash Buffer Concentrate 400X 5 mL     Wash Buffer Concentrate 400X

X-Gal     5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-Galactopyranoside; 5-bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl-β-D-galactopyranoside

yenine 5, 雙琥珀酰亞胺脂 [相當于Cy5 NHS]     yenine 5 bissuccinimidyl ester [equivalent to Cy5 bisNHS ester]

Valganciclovir xy7nochloride 50 mg     2-[2-ami,6-dixy7no-6-oxo-9H-purin-9-ylmetxoxy]-3-xy7noxypropyl ester L-valine, monoxy7nochloride; Ro 107-9070/194|Valcyte ; Valganciclovir xy7nochloride

5S),14R-Lipoxin B4 100 ug     5S,14R,15S-trixy7noxy-6E,8Z10E,12E-eicosatetraenoic acid; 5S),14R-LXB4; 5S),14R-Lipoxin B4

GSK-2830371     GSK2830371
YeastExtractDextroseChloramphenicolAgar

溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 250(g) incubation media 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 250(g)

M-H瓊脂平板 M-H Agar Plate 10

木糖-明膠培養(yǎng)基250用于蠟樣芽孢桿菌明膠液化試驗incubationmedia木糖-明膠培養(yǎng)基250用于蠟樣芽孢桿菌明膠液化試驗

T1N3肉湯 250g 用于霍亂弧菌的生長試驗(SN標準)
LPM添加劑每支添加于200mlHB4189

N6培養(yǎng)基 N6 Medium 用于植物組織培養(yǎng)

動力吲哚*培養(yǎng)基 MIO Medium 250 動力、吲哚和*試驗

選擇性APS超級肉湯基礎(chǔ)250g/瓶非動物源配方,用于培養(yǎng)重組大腸桿菌菌株,提高質(zhì)粒產(chǎn)量incubationmedia選擇性APS超級肉湯基礎(chǔ)250g/瓶非動物源配方,用于培養(yǎng)重組大腸桿菌菌株,提高質(zhì)粒產(chǎn)量

濾膜腸球菌瓊脂 250g 用于水或其他樣品中腸球菌的濾膜法分離或計數(shù)
植物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存發(fā)光菌培養(yǎng)基250g用于發(fā)光菌的分離培養(yǎng)。

50120 3號膽鹽 BR 100g incubation media 50120 3號膽鹽 BR 100g

光孢短柄帚霉 /

SOCMedium

Potatoliquidmedium

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