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植物種屬鑒定 PCR Mix 3100 次運(yùn)輸

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更新時間:2017-07-17 14:23:55瀏覽次數(shù):97次

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植物種屬鑒定 PCR Mix 3100 次運(yùn)輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

植物種屬鑒定 PCR Mix 3100 次運(yùn)輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
植物種屬鑒定 PCR Mix 3100 次運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
植物種屬鑒定 PCR Mix 3100 次運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
15-keto Prostaglandin F1α 1 mg     9。alpha。,11。alpha-dihydroxy-15-oxo-prost-13E-en-1-oic acid; 15-keto PGF1α; 15-keto Prostaglandin F1α

MF498 25 mg     N-[[[4-5,9-diethoxy-6,8-dihydro-6-oxo-7H-pyrrolo[3,4-g]quinolin-7-yl-3-methylphenyl]methyl]sulfonyl]-2-methoxy-benzeneacetamide

四水錄化錳(25GM     Manganese Chloride 4H2O, 13446-34-9; MW 197.91; ACS

Polygodial 1 mg     1R,4aS,8aS-1,4,4a,5,6,7,88a-octahydro-5,5,8a-trimethyl-1,2-nepxtxelenedicarboxaldehyde Tadeonal; Polygodial

5Z),8Z),11Z-Eicosatrienoic Acid methyl ester 1 mg     5Z,8Z11Z-eicosatrienoic acid, methyl ester Mead Acid methyl ester; 5Z),8Z),11Z-Eicosatrienoic Acid methyl ester

2-[1,2-Dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidenemethyl]-4-meth yl-1H-pyrrole-3-propanoic acid     SU-5402
SIRT2 Direct Peptide 1 ea     SIRT2 Direct Peptide

*標(biāo)記*基化組蛋白H3K36多肽     Biotinylated Trimethyl Histone H3K36 Peptide 100 ul

KH7 10 mg     2-1H-benzimidazol-2-ylthio-2-[5-bromo-2-hydroxyphenylmethylene]hydrazide, propanoic acid; KH7

JAK Inhibitor I 1 mg     CMP 6|Janus-Associated Kinase Inhibitor I|Pyridone 6; 2-1,1-dimethylethyl-9-fluoro-1,6-dihydro-7H-benz[h]imidazo[4,5-f]isoquinolin-7-one

SIRT1/2 Inhibitor IV 5 mg     2,3-dihydro-5-[2-hydroxy-1-naphthalenylmethyl]-6-phenyl-2-thioxo-41H-pyrimidinone; Cambinol|NSC 112546|SIRT1 Inhibitor II|SIRT2 Inhibitor VI SIRT1/2 Inhibitor IV

Leukotriene E4 Lipid Maps MS Standard (1 mg)     LTE4, Leukotriene E4 Lipid Maps MS Standard, 5S-hydroxy-6R-(S-cysteinyl)-7E,9E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid
Wash Buffer Concentrate 400X 12。5 mL     Wash Buffer Concentrate 400X

X-Gal     5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-Galactopyranoside; 5-bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl-β-D-galactopyranoside

yenine 5酰進(jìn) [相當(dāng)于Cy5酰進(jìn)]     yenine 5 hydrazide [equivalent to Cy5 hydrazide]

Valganciclovir xy7nochloride 25 mg     2-[2-ami,6-dixy7no-6-oxo-9H-purin-9-ylmetxoxy]-3-xy7noxypropyl ester L-valine, monoxy7nochloride; Ro 107-9070/194|Valcyte Valganciclovir xy7nochloride

5S),14R-Lipoxin B4 50 ug     5S,14R15S-trixy7noxy-6E,8Z,10E,12E-eicosatetraenoic acid 5S),14R-LXB4; 5S),14R-Lipoxin B4

GSK-2830371     GSK2830371
CNAgar

溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液 Bromocresol Purple Peptone Medium 用于壓力蒸氣消毒過程監(jiān)測指示菌(嗜熱脂肪桿菌芽孢)的培養(yǎng)及消毒效果測定

改良MC乳酸菌瓊脂培養(yǎng)基 Chalmers Agar Modified 250 用于食品中乳酸菌總數(shù)的測定

乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂250用于濾膜MUG法檢測食品中大腸菌群數(shù)(SN/T2)incubationmedia乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂250用于濾膜MUG法檢測食品中大腸菌群數(shù)(SN/T2)

BrainHeartInfu
BLB培養(yǎng)基250g用于雙歧桿菌的分離培養(yǎng)

M-肉湯 M-Broth 用于干燥食品和種子中沙門氏菌增菌培養(yǎng)

豬膽鹽 Bile salt from pig 25 BR,65%

需氧-厭氧菌瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于滅菌與消毒鑒定試驗(yàn)incubationmedia需氧-厭氧菌瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于滅菌與消毒鑒定試驗(yàn)

HB-PETAuto-IndectionMedium
植物種屬鑒定 PCR Mix 3100 次運(yùn)輸photobacteriumMedium

50130 去氧膽酸鈉 BR 100g 細(xì)菌培養(yǎng)基的選擇性抑制劑 incubation media 50130 去氧膽酸鈉 BR 100g 細(xì)菌培養(yǎng)基的選擇性抑制劑

龜裂鏈霉菌 分離源:電器 /

2×YT肉湯250用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)

改良察氏液體培養(yǎng)基 250g 用于霉菌的增菌培養(yǎng)

植物種屬鑒定 PCR Mix 3100 次運(yùn)輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合

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