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動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存

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更新時(shí)間:2017-07-17 14:18:25瀏覽次數(shù):95次

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動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒有必要。
動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
11-deoxy Prostaglandin F1α 10 mg     9。alpha。,15S-dihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 11-deoxy PGF1α; 11-deoxy Prostaglandin F1α

25C-NBF hydrochloride 1 mg     2;C-C-NBF; 4-chloro-N-[2-fluorophenylmethyl]-2,5-dimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride

流*(1GM     Gentamicin Sulfate, USP Grade Number: 1405-41-0.

MTEP hydrochloride 10 mg     3-[2-2-methyl-4-thiazolylethynyl]-pyridine monohydrochloride MTEP hydrochloride

Carbaprostacyclin methyl ester 10 mg     6,9α-methylene-11α,15S-dihydroxy-prosta-5E,13E-dien-1-oic acid, methyl ester; Carbaprostacyclin methyl ester

Methyl 2ɑ,5β,6 ɑ)-3,4-didehydroibogamine-18 β -carboxylate ; 6,9-Methano-5H-pyrido[1’,2:12]azepino[4,5-b]indole     Catharanthine
SET7/9 human recombinant MT Assay Reagent 1 ea     SET7/9 human recombinant); SET7/9 human recombinant MT Assay Reagent

C646     C646, p300/CBP Inhibitor 1 mg

24-Dimethylthiazole-5-Carboxylic Acid 250 mg     2,4-dimethyl-5-thiazolecarboxylic acid 2,4-Dimethylthiazole-5-Carboxylic Acid

Roflumilast 10 mg     B 9302-107|BY 217|BYK 20869|Daxas; 3-cyclopropylmethoxy-N-3,5-dichloro-4-pyridinyl-4-difluoromethoxy-benzamide

A-771726 10 mg     2-cyano-3-hydroxy-N-[4-trifluoromethylphenyl]-2Z-butenamide; Teriflunomide|Flucyamide|HMR 1726|SU 2A-771726

Prostaglandin E2 Lipid Maps MS Standard (50 mg)     Dinoprostone|PGE2, Prostaglandin E2 Lipid Maps MS Standard, 9-oxo-11α,15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
wo7ium Acetate 500 dtn 4。1 g))     wo7ium Acetate

Glyceryl Triheptadecanoate 50 mg     1,1,1’’-1,2,3-propanetriyl ester-heptadecanoic acid

yenine 3 [相當(dāng)于Cy3]     yenine 3 amine [equivalent to Cy3 amine]

Activated SureLight R-Phycoerythrin R-PE 1 ea     Activated SureLight R-Phycoerythrin R-PE

9,12-Octadecadiynoic Acid 10 mg     9,12-octadecadiynoic acid; Ro 3-1314; 912-Octadecadiynoic Acid

2-4-Benzylpxenoxy-N-1-benzylpiperidin-4-ylacetamide, xy7nochloride     AdipoRon xy7nochloride
科瑪嘉ECC顯色培養(yǎng)基M0305-0ml/瓶用于大腸桿菌和大腸菌群的鑒定和計(jì)數(shù)

魯氏接合酵母 /

M肉湯20/包用于干燥食品和種子中沙門氏菌增菌培養(yǎng)

抗生素檢定培養(yǎng)基2號(hào)(pH) 250g 用于*,*等效價(jià)測(cè)定
SSDCMedium

賴氨酸鐵瓊脂(LIA) Lysine Iron Agar 用于食品中沙門氏菌生化試驗(yàn)(FDA標(biāo)準(zhǔn))

脫氫牛膽粉 OX Bile dihydrate purified 250 BR

溴甲酚紫平板計(jì)數(shù)瓊脂BCP250g/瓶用于乳酸菌總數(shù)測(cè)定incubationmedia溴甲酚紫平板計(jì)數(shù)瓊脂BCP250g/瓶用于乳酸菌總數(shù)測(cè)定

TTCSolution(0.125%)
動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次保存C.L.E.D培養(yǎng)基添加劑支每支加入C.L.E.D培養(yǎng)基中

50220 大豆蛋白胨 BR 400g 氮源、碳水化合物、維生素B1 incubation media 50220 大豆蛋白胨 BR 400g 氮源、碳水化合物、維生素B1

糞腸球菌 食用 /

改良Skirrow氏瓊脂平板(9cm)用于彎曲桿菌的分離培養(yǎng)

無機(jī)鹽瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于紡織品防霉性能測(cè)試

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