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更新時間:2017-07-17 14:17:39瀏覽次數(shù):208次
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動物種屬鑒定 PCR Mix 2100 次圖片產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
動物種屬鑒定 PCR Mix 2100 次圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
動物種屬鑒定 PCR Mix 2100 次圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
動物種屬鑒定 PCR Mix 2100 次圖片使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
11-deoxy Prostaglandin F1β (50 mg) 9。beta。,15S-dihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 9β,11-deoxy PGF1α|11-deoxy PGF1β; 11-deoxy Prostaglandin F1β
Palmitoyl Alkyne-Coenzyme A (trifluoroacetate salt) (250 ug) 15-hexadecynoyl-CoA|Click Tag
L-*(5KG) L-Glutamine, 56-85-9; MW 146.14; C5H10N2O3; USP Grade; Endotoxin and cell culture tested.
BMPO (50 mg) 3,4-dihydro-2-methyl-1,1-dimethylethyl ester-2H-pyrrole-2-carboxylic acid-1-oxide; BocMPO; BMPO
BHT (500 mg) 2,6-di-tert-butyl-4-hydroxytolue; Butylated Hydroxy tolue; BHT
5-Aminoimidazole-4-carboxamide 1-β-D-ribofuranoside; AICA-Riboside; NSC 105823 AICAR
ALT Assay Initiator (1 ea) ALT Assay Initiator
RG 108 RG 108 (10 mg)
2,4-Dimethylthiazole-5-Carboxylic Acid (1 g) 2,4-dimethyl-5-thiazolecarboxylic acid; 2,4-Dimethylthiazole-5-Carboxylic Acid
Zinquin ethyl ester (500 ug) 2-[[2-methyl-8-[[(4-methylphenyl)sulfonyl]amino]-6-quinolinyl]oxy]-acetic acid, ethyl ester
MK 25 (hydrochloride) (25 mg) 5-(4-chlorophenyl)-N-[4-(1-piperazinyl)phenyl]-N-(2-pyridinylmethyl)-2-furancarboxamide, monohydrochloride; MK 25 (hydrochloride)
Prostaglandin D2 Ethanolamide Lipid Maps MS Standard (50 mg) PGD2-EA, Prostaglandin D2 Ethanolamide Lipid Maps MS Standard, N-(2-hydroxyethyl)-11-oxo-9.alpha.,15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-amide
metxoxylamine HCl (500 dtn (0。5 g)) metxoxylamine HCl
Glyceryl Triheptadecanoate (1 g) 1,1’,1’’-(1,2,3-propanetriyl) ester-heptadecanoic acid
yenine 3疊氮化物 [相當(dāng)于Cy3疊氮化物] yenine 3 azide [equivalent to Cy3 azide]
Olanzapine (50 mg) 2-metxyl-4-(4-metxyl-1-piperazinyl)-10H-thieno[2,3-b][1,5]benzodiazepine; Zyprexa ; Olanzapine
2-xy7noxymyristic Acid (500 mg) 2-xy7noxytetradecanoic acid; 2-xy7noxymyristic Acid
(2S, 3S)-2-Amino-3 –metxyl-1-(thiazolidin-3-yl)pentan-1-one hemi-fumarate DPPIV Inhibitor, P32/98
PhenolRedDextroseBroth
西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂 Simmons Citrate Agar 用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(GB標(biāo)準(zhǔn))
胰蛋白胨水培養(yǎng)基 Peptone Water Medium 250 用于靛基質(zhì)試驗
乙基紫疊鈉肉湯EVA250g/瓶用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)incubationmedia乙基紫疊鈉肉湯EVA250g/瓶用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)
SorbitolMacConkeyAgarAdditives
BairdParkerAgarMedium
MH肉湯(MHB) 250(g) incubation media MH肉湯(MHB) 250(g)
四硫磺酸鈉亮綠增菌液 2X5支 含碘液2ml/支和煌綠1ml/支,2支添加于100mL(023031)中配成TTB
溴化十六烷基*胺瓊脂培養(yǎng)基CetrimideAgarMedium用于綠膿假單胞菌的分離培養(yǎng)
改良磷酸鹽緩沖液PSB 250g 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌增菌培養(yǎng)
動物種屬鑒定 PCR Mix 2100 次圖片C.L.E.DMediumSupplement
50260 水解乳蛋白 BR 400g 乳蛋白水解而成 incubation media 50260 水解乳蛋白 BR 400g 乳蛋白水解而成
糞腸球菌(糞鏈球菌) 釀造白酒 支/瓶
ModifiedSkirrowAgar
InorganicAgar
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