當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>核酸擴增產(chǎn)品>> 單細(xì)胞懸浮液1mL圖片
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更新時間:2017-07-17 14:15:33瀏覽次數(shù):120次
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古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存
單細(xì)胞懸浮液1mL圖片產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
單細(xì)胞懸浮液1mL圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
單細(xì)胞懸浮液1mL圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
單細(xì)胞懸浮液1mL圖片詳細(xì)說明書:
單細(xì)胞懸浮液1mL圖片使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
11β-Prostaglandin F1β (50 mg) 9。beta。,11。beta。,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 9β,11β-PGF1α|11β-PGF1β|11-epi PGF1β; 11β-Prostaglandin F1β
25B-NBF (hydrochloride) (10 mg) 2;C-B-NBF; 4-bromo-N-[(2-fluorophenyl)methyl]-2,5-dimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride
*-EDTA溶液0.25%(1X)(100ML) Trypsin-EDTA Solution, 0.25% (1X), Contains 0.25% trypsin and 1mM EDTA in Hank’s Balanced Salt Solution without calcium and magnesium. Sterile filtered. Porcine parvovirus and mycoplasma tested.
Adenosine 5’-(γ-thio)-triphosphate (lithium salt) (5 mg) P’-anhydride with phosphorothioic acid adenosine 5’-(trihydrogen diphosphate), tetralithium salt; ATPγS; Adenosine 5’-(γ-thio)-triphosphate (lithium salt)
Carnosol (10 mg) 1,3,4,9,10,10aS-hexahydro-5,6-dihydroxy-1,1-dimethyl-7-isopropyl-2H-9S,4aR-(epoxymethano)phenanthren-12-one; Carnosol
(S)-4-ethyl-4-hydroxy-1H-pyrano[3’,4’:6,7]indolizi,2-b]quinoline-3,14-(4H,12H)-dione Camptothecin
PA Assay 1% Triton X-100 (1 ea) PA Assay 1% Triton X-100
曲古菌素A Trichostatin A (1 mg)
ethyl-2,4-dimethyl-Thiazole-5-Carboxylate (1 g) 2,4-dimethyl-5-thiazolecarboxylic acid, ethyl ester; ethyl-2,4-dimethyl-Thiazole-5-Carboxylate
CAY10678 (5 mg) N-
G-36 (10 mg) (4S)-rel-4-(6-bromo-1,3-benzodioxol-5-yl)-3aR,4,5,9bS-tetrahydro-8-(1-methylethyl)-3H-cyclopenta[c]; G-36
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin A2 Lipid Maps MS Standard (10 mg) 13,14-dh-15-k PGA2, 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin A2 Lipid Maps MS Standard, 9,15-dioxo-prosta-5Z,1-dien-1-oic acid
384-Well Solid Plate (black) (1 ea) 384-Well Solid Plate (black)
Erythromycin Ak-Mycin|Eryc|NSC 55929|Staticin; erythromycin
yenine 3。5胺 [相當(dāng)于Cy3。5胺] yenine 3。5 amine [equivalent to Cy3。5 amine]
R406 (25 mg) 6-[[5-fluoro-2-[(3,4,5-trimetxoxypxenyl)amino]-4-pyrimidinyl]amino]-2,2-dimetxyl-2H-pyrido[3,2-b]-1,4-oxazin-3(4H)-one
Docosatetraenoyl Ethanolamide (50 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-7Z,10Z,13Z,16Z-docosatetraenamide; DEA; Docosatetraenoyl Ethanolamide
N-Isobutyl-N-(4-metxoxypxenylsulfonyl)glycyl xy7noxamic acid MMP-III Inhibitor, NNGH
BrothAgarMedium
戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎(chǔ) 250(g) incubation media 戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
PALCAM瓊脂 PALCAM Agar 250克 單增李氏菌的選擇性分離
蔗糖瓊脂250用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia蔗糖瓊脂250用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
志賀氏菌增菌肉湯 250g 用于志賀氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
Actinomycetesculturemedium
Pseudomonas Agar F incubation media Pseudomonas Agar F
產(chǎn)黃青霉 支/瓶
新生霉素*5每支添加于225mlHBJ8663中
胰蛋白胨水培養(yǎng)基 250g 用于靛基質(zhì)試驗
單細(xì)胞懸浮液1mL圖片BSSAagarmedium
50301 明膠 BR 500g incubation media 50301 明膠 BR 500g
海洋鹽單胞菌 支/瓶
HB-PE自誘導(dǎo)培養(yǎng)基250用于基因工程菌大腸桿菌自誘導(dǎo)蛋白表達(dá)培養(yǎng)
FungalMedium
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