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更新時(shí)間:2017-07-17 14:14:33瀏覽次數(shù):217次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)高 GC 革氏陽(yáng)性細(xì)菌 PCR Mix 5100 次圖片
古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存
單細(xì)胞裂解液 (DNA)1mL保存使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
單細(xì)胞裂解液 (DNA)1mL保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
單細(xì)胞裂解液 (DNA)1mL保存DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
單細(xì)胞裂解液 (DNA)1mL保存詳細(xì)說(shuō)明書(shū):
11β-Prostaglandin F1β (10 mg) 9。beta。,11。beta。,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 9β,11β-PGF1α|11β-PGF1β|11-epi PGF1β; 11β-Prostaglandin F1β
TZ9 (5 mg) 4-amino-6-(phenylamino)-2-(4-nitnobenzoate)-1,3,5-tri-2-methanol
1000X Gamborg’s維生素混合物溶液(100ML) Gamborg’s Vitamin Mixture, 1000X Solution
Adenosine 5’-(γ-thio)-triphosphate (litxium salt) (1 mg) P’-anhydride with phosphorothioic acid adenosine 5’-(trihydrogen diphosphate), tetralitxium salt; ATPγS; Adenosine 5’-(γ-thio)-triphosphate (litxium salt)
CAY10398 (5 mg) 4-(dimethylamino)-N-[6-(hydroxyamino)-6-oxohexyl]-benzamide; MD 85|PX 089274; CAY10398
(S)-4-ethyl-4-hydroxy-1H-pyrano[3’,4’:6,7]indolizi,2-b]quinoline-3,14-(4H,12H)-dione Camptothecin (2 mM)
PA Assay ADHP (1 ea) PA Assay ADHP
丁酸鈉 Sodium Butyrate (1 g)
4-Methylbenzamide oxime (1 g) N-hydroxy-4-methyl-benzenecarboximidamide; p-Toylamideoxime; 4-Methylbenzamide oxime
CAY10678 (1 mg) N-
PB-22 N-pentanoic acid metabolite (5 mg) 5-(3-((quinolin-8-yloxy)carbonyl)-1H-indol-1-yl)pentanoic acid; PB-22 N-pentanoic acid metabolite
Microcystin-LR (500 ug) Cyanoginosin-LR, Microcystin-LR, Toxin T 17 (Microcystis aeruginosa)
Phosphate Buffer (100 dtn) Phosphate Buffer
1-thio-β-D-Glucose (wo7ium salt) (250 mg) Click Tag
5-FAM疊氮化物 5-FAM Azide
UNC0631 (25 mg) N-[1-(cyclohexylmetxyl)-4-piperidinyl]-2-[hexaxy7no-4-(1-metxyletxyl)-1H-1,4-diazepin-1-yl]-6-metxoxy-7-[3-(1-piperidinyl)propoxy] 4-inoneazolinamine
Docosatetraenoyl Ethanolamide (25 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-7Z,10Z,13Z,16Z-docosatetraenamide; DEA; Docosatetraenoyl Ethanolamide
4-(4-Benzofurazanyl)-1,4-dixy7no-2,6-dimetxyl-3,5-pyridinedicarboxylic acid, metxyl, 1-metxylester diester Neurodezine
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)250g用于單增李氏菌的選擇性分離(SN標(biāo)準(zhǔn))
無(wú)機(jī)鹽瓊脂培養(yǎng)基 Inorganic Agar 用于紡織品防霉性能測(cè)試
固體改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基 Martin Solid,Modified 250克 生物制品無(wú)菌試驗(yàn)的霉菌檢查
22ubos肉湯基礎(chǔ)添加劑5ml×盒每2支用于90ml中incubationmedia22ubos肉湯基礎(chǔ)添加劑5ml×盒每2支用于90ml中
CCFA瓊脂基礎(chǔ) 250g 用于艱難梭菌選擇性分離培養(yǎng)
*卵黃多粘菌素瓊脂平板(MYP)2838mX20個(gè)用于蠟樣芽孢桿菌的菌數(shù)測(cè)定及分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.64,GB/T4789.03,SN02和...
*葡萄糖酵母提取物選擇性培養(yǎng)基(OGYE培養(yǎng)基) (CM0545) Oxoid incubation media *葡萄糖酵母提取物選擇性培養(yǎng)基(OGYE培養(yǎng)基) (CM0545) Oxoid
炭黑曲霉 分離源:發(fā)酵劑 支/瓶
心浸液瓊脂250g用于培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求高的微生物
克氏雙糖鐵瓊脂 250g 用于細(xì)菌復(fù)合生化試驗(yàn)(葡
單細(xì)胞裂解液 (DNA)1mL保存脫脂奶蔗糖胰蛋白胨瓊脂250g用于致病性嗜水氣單胞菌的鑒別培養(yǎng)
50327 麥芽提取粉 BR 400g 培養(yǎng)基原材料,特制適用于培養(yǎng)酵母菌 incubation media 50327 麥芽提取粉 BR 400g 培養(yǎng)基原材料,特制適用于培養(yǎng)酵母菌
海濱芽孢桿菌 產(chǎn)*酸 支/瓶
TerrificBroth
野生酵母培養(yǎng)基 250g 用于野生酵母計(jì)數(shù)培養(yǎng)
單細(xì)胞裂解液 (DNA)1mL保存變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95℃。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合
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