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單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒 24 次運(yùn)輸

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更新時(shí)間:2017-07-17 14:14:09瀏覽次數(shù):151次

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單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒 24 次運(yùn)輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒 24 次運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒 24 次運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒 24 次運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒 24 次運(yùn)輸詳細(xì)說(shuō)明書:

單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒 24 次運(yùn)輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
11β-Prostaglandin F1β 1 mg     9beta。,11。beta。,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid 9β,11β-PGF1α|11β-PGF1β|11-epi PGF1β; 11β-Prostaglandin F1β

TZ9 25 mg     4-amino-6-phenylamino-2-4-nitnobenzoate-1,3,5-tri-2-methanol

杜氏磷酸緩沖液(500ML     Dulbecos PBS With calcium and magnesium

Imiquimod 500 mg     1-2-methylpropyl-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-4-amine Aldara|Beselna|R-837|TMX 101|Zyclara; Imiquimod

CAY10398 25 mg     4-dimethylamino-N-[6-hydroxyamino-6-oxohexyl]-benzamide MD 85|PX 089274; CAY10398

6-Benzylamino-2[R-1-ethyl-2-hydroxyethylamino]-9-isopropylpurine; CYC202; Seliciclib     Roscovitine
PA Assay Enzyme Mixture 1 ea     PA Assay Enzyme Mixture

伏立諾他     SAHA 10 mg

Benzamideoxime 500 mg     N-hydroxy-benzenecarboximidamide; NSC 13999; Benzamideoxime

Desomonpxine 5 mg     d; 4,5α-epoxy-17-methyl-morphinan-3-ol

PB-22 N-pentanoic acid metabolite 10 mg     5-3-((quinolin-8-yloxycarbonyl-1H-indol-1-ylpentanoic acid; PB-22 N-pentanoic acid metabolite

Microcystin-LR (100 ug)     Cyanoginosin-LR, Microcystin-LR, Toxin T 17 (Microcystis aeruginosa)
eeti enxy7ni7e 5 ea     eeti enxy7ni7e

1-thio-β-D-Glucose wo7ium salt 1 g     Click Tag

2-NBDG [2-N-7-nitnobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-ylAmino-2-Deoxyglucose]     2-NBDG [2-N-7-nitnobenz-2-oxa-13-diazol-4-ylAmino-2-Deoxyglucose]

Citreoviridin 5 mg     2,5-anxy7,6-dideoxy-2-C-[8-4-metxoxy-5-metxyl-2-oxo-2H-pyran-6-yl-2-metxyl-1E,3E,5E,7E-octatetraen-1-yl]-4-C-metxyl-D-iditol

Docosatetraenoyl Ethanolamide 10 mg     N-2-xy7noxyetxyl-7Z,10Z13Z,16Z-docosatetraenamide DEA; Docosatetraenoyl Ethanolamide

4-4-Benzofurazanyl-14-dixy7no-2,6-dimetxyl-35-pyridinedicarboxylic acid, metxyl 1-metxylester diester     Neurodezine
新生霉素/*5每支加入HB4153

無(wú)機(jī)磷細(xì)菌培養(yǎng)基 250g 用于測(cè)定磷細(xì)菌肥料中磷細(xì)菌分解無(wú)機(jī)磷的效能

丙二酸鈉培養(yǎng)基 Malonate Broth 10 生化培養(yǎng)基,用于細(xì)菌丙二酸鹽利用試驗(yàn)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))

Letheen瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于化妝品衛(wèi)生微生物檢測(cè),每升培養(yǎng)基中需添加0ncubationmediaLetheen瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于化妝品衛(wèi)生微生物檢測(cè),每升培養(yǎng)基中需添加0107

牛津瓊脂(OXA)平板(9cm) 10個(gè)/ 用于單增李氏菌的選擇性分離
PotassiumluriteBloodAgarBase

Listeria enrichment broth acc.to FDA 李斯特氏菌富集肉湯 1.10549.0500 MERCK默克 incubation media Listeria enrichment broth acc.to FDA 李斯特氏菌富集肉湯 1.10549.0500 MERCK默克

*瓊脂 250g 用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。

小鼠神經(jīng)干細(xì)胞成星形膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基Mouseneuralstemcellsi
單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒 24 次運(yùn)輸GramNegativeBacteriaSelectiveMedium

50330 糊精 BR 500g incubation media 50330 糊精 BR 500g

海藻希瓦氏菌 產(chǎn)* /

即用型平板培養(yǎng)基

馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) 250g 用于霉菌,酵母菌計(jì)數(shù)(GB/SN標(biāo)準(zhǔn))

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