天凈沙單細胞 RNA 擴增試劑盒80 次圖片詳細說明書：

天凈沙單細胞 RNA 擴增試劑盒80 次圖片產(chǎn)品及特點：
易錯 PCR（error-prone PCR）是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性，在一定條件下（如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在）能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法，則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下：本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā)，本產(chǎn)品具有下列特點：
1. 即開即用，十分簡單方便，尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化，突變率穩(wěn)定，突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% （±0.13%），詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單，但如果在 PCR 引物中設計位點，則可使產(chǎn)物克隆到表達載體，也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR（sequential error-prone PCR），只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可，使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物，對于 1kb 以上的產(chǎn)物，建議分段擴增。
天凈沙單細胞 RNA 擴增試劑盒80 次圖片變性溫度與時間：
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度，達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板，PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*， DNA 雙鏈會很快復性，因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高，又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒，高溫時間應盡量縮短，以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力， 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間：退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強，但過高則引物 不能與模板牢固結合.
天凈沙單細胞 RNA 擴增試劑盒80 次圖片DNA 擴增效率下降；
溫度低產(chǎn)量高，但過低可造成引物與模板 錯配，非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度，可根據(jù)引物的（G+C）%含量進行推測，一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃，退火時間一般為 30~60 秒，足以使引物與模板之間*結 合，長時間退火沒有必要。
天凈沙單細胞 RNA 擴增試劑盒80 次圖片使用方法：
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例，如果反應體系不是 30 uL，各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中，加入下列成分：易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板（10ng/uL） 1 uL PCR 引物(自備，10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶（5U/uL） 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR（循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表），然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件，一般可以先嘗試下面的 PCR 條件： PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次（見注） 72℃ 1 分鐘注：易錯 PCR 一般不需要熱啟動，也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
Prostaglandin F1β （50 mg）     9。beta。，11。alpha。，15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid； 9β-PGF1α|PGF1β； Prostaglandin F1β

TZ9 （10 mg）     4-amino-6-（phenylamino）-2-（4-nitnobenzoate）-1,3,5-tri-2-methanol

10X杜氏磷酸緩沖液（500ML）     Dulbecco’s PBS （10x）， 10X D-PBS without calcium and magnesium. Sterile filtered.

Imiquimod （250 mg）     1-（2-methylpropyl）-1H-imidazo[4，5-c]quinolin-4-amine； Aldara|Beselna|R-837|TMX 101|Zyclara； Imiquimod

CAY10398 （10 mg）     4-（dimethylamino）-N-[6-（hydroxyamino）-6-oxohexyl]-benzamide； MD 85|PX 089274； CAY10398

6-Benzylamino-2[（R）-（1’-ethyl-2’-hydroxyethylamino）]-9-isopropylpurine； CYC202； Seliciclib     Roscovitine
Phosphatidic Acid Assay Standard （1 ea）     Phosphatidic Acid Assay Standard

伏立諾他      Discontinued SAHA （1 mg）

Benzamideoxime （1 g）     N-hydroxy-benzenecarboximidamide； NSC 13999； Benzamideoxime

Desomonpxine （25 mg）     d； 4,5α-epoxy-17-methyl-morphinan-3-ol

PB-22 N-pentanoic acid metabolite （1 mg）     5-（3-（（quinolin-8-yloxy）carbonyl）-1H-indol-1-yl）pentanoic acid； PB-22 N-pentanoic acid metabolite

Microcystin-LR (50 ug)     Cyanoginosin-LR, Microcystin-LR, Toxin T 17 (Microcystis aeruginosa)
eeti enxy7ni7e （1 ea）     eeti enxy7ni7e

Zilpaterol     RU-42173|Zilmax； （6R,7R）-rel-4,5,6,7-tetraxy7no-7-xy7noxy-6-[（1-metxyletxyl）amino]-imidazo[4,5,1-jk][1]benzazepin-2（1H）-one

紅色活細胞熒光探針Cytol Red     Cytol Red

AS-605240 （25 mg）     5-（6-inoneoxalinylmetxylene）-2,4-thiazolidinedione

2-Fluoropalmitic Acid （50 mg）     2-fluorohexadecanoic acid； 2-Fluoropalmitic Acid

（2S，3R，4R，6E）-2-Amino-3，4-dixy7noxy-2-（xy7noxymetxyl）-14-oxo-6-eicosenoic acid     Myriocin （ISP-1）
LactobacillusSelectiveAgar

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