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更新時(shí)間:2017-07-17 14:05:26瀏覽次數(shù):153次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)高 GC 革氏陽性細(xì)菌 PCR Mix 5100 次圖片
古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存
NTP 溶液,10mM0.5mL保存詳細(xì)說明書:
NTP 溶液,10mM0.5mL保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
NTP 溶液,10mM0.5mL保存變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
NTP 溶液,10mM0.5mL保存DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時(shí)間退火沒有必要。
NTP 溶液,10mM0.5mL保存使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
8-iso Prostaglandin F1α (10 mg) 9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-(8。beta。)-prost-13E-en-1-oic acid; 8-epi PGF1α; 8-iso Prostaglandin F1α
(R)-Prunasin (5 mg) (αR)-
超濾酵母提取物(500GM) Yeast Extract, Ultra Filtered, 8013-01-3
Digitonin (500 mg) (2α,3β,5α,15β,25R)-2,15-dihydroxyspirostan-3-yl O-β-D-glucopyranosyl-(1→3)-O-β-D-galactopyranosyl-(1→2)-O-[β-D-xylopyranosyl-(1→4)-β-D-galactopyranoside; Digitin|NSC 23471|NSC 237417; Digitonin
nitnotyrosine BSA (200 ug) Peroxynitnite-treated BSA; nitnotyrosine BSA
Q-LE(OMe)-HD(OMe)-OPh; inoneolyl-Leu-Glu(OMe)-His-Asp(OMe)-OPh Caspase-9 Inhibitor, Q-LEHD-OPh
SMase Acid Solution (1 ea) SMase Acid Solution
乙酰化組蛋白H4K16多肽 Acetyl Histone H4K16 Peptide (200 ul)
Fumonisin B2 (1 mg) 1,1’-[(1S,2R)-1-[(2S,9R,11S,12S)-12-amino-9,11-dihydroxy-2-methyltridecyl]-2-[(1R)-1-methylpentyl]-1,2-ethanediyl]ester-1,2,3-propanetricarboxylic acid; Fumonisin B2
HPOB (5 mg) 4-[(hydroxyamino)carbonyl]-N-(2-hydroxyethyl)-N-phenyl-benzeneacetamide
5-fluoro PB-22 3-carboxyindole metabolite (5 mg) 1-(5-fluoropentyl)-1H-indole-3-carboxylic acid; 5-fluoro PB-22 3-carboxyindole metabolite
Stearidonic Acid ethyl ester (25 mg) Ethyl Stearidonate|Moroctic Acid ethyl ester, Stearidonic Acid ethyl ester, 6Z,9Z,12Z,15Z-octadecatetraenoic acid, ethyl ester
SPE Cartridges (Mixed Bed) (10 ea) Bond Elut Certify II; SPE Cartridges (Mixed Bed)
1,3-Dilinoleoyl-rac-glycerol (500 mg) 1,3-Dilinolein|1,3-Glyceryl dilinoleate; 1,1’-(2-xy7noxy-1,3-propanediyl) ester-9Z,12Z-octadecadienoic acid
RatioWorks PDMPO, 右旋糖苷 RatioWorks PDMPO Dextran
2-metxoxy ketemine (xy7nochloride) (10 mg) 2-(2-metxoxypxenyl)-2-(metxylamino)-cyclohexanone, monoxy7nochloride
Oleamide (100 mg) 9Z-octadecenamide; cis-9-Octadecenamide; Oleamide
1-(4-metxoxypxenyl)-2-metxyl-3-nitH-indol-6-ol ID-8
改良月桂基鹽胰蛋白月示肉湯(MLST)2220g用于奶粉中阪崎腸桿菌的檢驗(yàn)的增菌和分子生物學(xué)檢驗(yàn)方法(PCR)選擇性增菌
彎曲菌無血選擇瓊脂基礎(chǔ) (CM0739) Oxoid incubation media 彎曲菌無血選擇瓊脂基礎(chǔ) (CM0739) Oxoid
威爾酵母 藥用菌 支/瓶
MEE肉湯250g用于腸道菌的選擇性增菌培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))
十二烷基鈉瓊脂 250g 用于鼠疫桿菌抗噬菌體培養(yǎng)
BufferedPower-nitratemedium
乙酰胺瓊脂 Acetamide Agar 用于綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
胰蛋白胨大豆快綠瓊脂 Tryptic Soy Fast Green Agar 250克 濾膜細(xì)菌總數(shù)的測定和分離培養(yǎng)
現(xiàn)隱肉湯用于水中大腸菌群計(jì)數(shù)(US-EPA方法)incubationmedia現(xiàn)隱肉湯用于水中大腸菌群計(jì)數(shù)(US-EPA方法)
UreaseAgarBase
NTP 溶液,10mM0.5mL保存Koser氏枸椽酸鹽肉湯2200g用于細(xì)菌的枸櫞酸鹽的試驗(yàn)
6201-prf CMM-prf 心肌細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 6201-prf CMM-prf 心肌細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
Sabouraud’sGlucoseAgarMedium
DNA酶瓊脂于核糖核酸酶檢測
BM液體培養(yǎng)基 250g 用于醋酸鈣不動(dòng)桿菌增菌培養(yǎng)
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