當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>核酸擴增產(chǎn)品>> 3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD
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3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運輸詳細說明書:
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運輸產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運輸使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
8-iso Prostaglandin F1α (1 mg) 9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-(8。beta。)-prost-13E-en-1-oic acid; 8-epi PGF1α; 8-iso Prostaglandin F1α
(R)-Prunasin (1 mg) (αR)-
超濾酵母提取物(2.5KG) Yeast Extract, Ultra Filtered, 8013-01-4
Digitonin (250 mg) (2α,3β,5α,15β,25R)-2,15-dihydroxyspirostan-3-yl O-β-D-glucopyranosyl-(1→3)-O-β-D-galactopyranosyl-(1→2)-O-[β-D-xylopyranosyl-(1→4)-β-D-galactopyranoside; Digitin|NSC 23471|NSC 237417; Digitonin
nitnotyrosine (5 g) 3-nitno-L-tyrosine; nitnotyrosine
8,8’-[Carbonylbis[imino-3,1-phenylenecarbonylimino(4-methyl-3,1-phenylene)carbonylimino]]bis-1,3,5-nepxtxelenetrisulfonic acid hexasodium salt Sunemin Hexasodium Salt
SMase Fluorometric Substrate (1 ea) SMase Fluorometric Substrate
乙?;M蛋白H4K16多肽 Acetyl Histone H4K16 Peptide (100 ul)
trans-Zeatin (50 mg) 2E-methyl-4-(9H-purin-6-ylamino)-2-buten-1-ol; trans-Zeatin
HPOB (10 mg) 4-[(hydroxyamino)carbonyl]-N-(2-hydroxyethyl)-N-phenyl-benzeneacetamide
5-fluoro PB-22 3-carboxyindole metabolite (10 mg) 1-(5-fluoropentyl)-1H-indole-3-carboxylic acid; 5-fluoro PB-22 3-carboxyindole metabolite
Oleic Acid-2,6-diisopropylanilide (100 mg) Oleic Acid-2,6-diisopropylanilide, N-[2,6-bis(1-methylethyl)phenyl]-9Z-octadecenamide
SPE Cartridges (C-18) (6 ml) (5 ea) C-18 Column|Solid Phase Extraction Cartridges; SPE Cartridges (C-18) (6 ml)
1,3-Dilinoleoyl-rac-glycerol (50 mg) 1,3-Dilinolein|1,3-Glyceryl dilinoleate; 1,1’-(2-xy7noxy-1,3-propanediyl) ester-9Z,12Z-octadecadienoic acid
RatioWorks PDMPO, 琥珀酰亞胺酯 RatioWorks PDMPO, SE
Rosiglitazone meleete (1 g) Avandia|BRL 49653C; 5-[[4-[2-(metxyl-2-pyridinylamino)ethoxy]pxenyl]metxyl]-2,4-thiazolidinedione, (2Z)-2-butenedioate (1:1)
Oleamide (1 g) 9Z-octadecenamide; cis-9-Octadecenamide; Oleamide
1-(4-metxoxypxenyl)-2-metxyl-3-nitH-indol-6-ol ID-8
改良月桂基鹽胰蛋白胨肉湯(MLST)2220g用于奶粉中阪崎腸桿菌的檢驗的增菌和分子生物學檢驗方法(PCR)選擇性增菌(GB4789.40-201...
彎曲菌瓊脂基礎 (CM0689) Oxoid incubation media 彎曲菌瓊脂基礎 (CM0689) Oxoid
脫氮假單胞菌 殺鱗翅目昆蟲 支/瓶
Voges-Proskauer(V-P)試劑5ml*4用于V-P試驗
BacterialL-growingAgar
3%堿性蛋白胨水250g用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng)
假單胞菌cfc選擇性培養(yǎng)基添加劑 1ml*5支 每支加入200ml假單胞菌cfc選擇性培養(yǎng)基中。
BPL瓊脂 BPL Agar 250 用于食品中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(Merck方法)
現(xiàn)隱肉湯PA250g/瓶用于水中大腸菌群計數(shù)incubationmedia現(xiàn)隱肉湯PA250g/瓶用于水中大腸菌群計數(shù)
XLD培養(yǎng)基平板(9cm) 10個/包 選擇性培養(yǎng)基,主要用于分離志賀氏菌屬,亦可用于分離沙門氏菌
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運輸西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基2200g用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗
6511-prf CEpiCM-prf 角膜上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 6511-prf CEpiCM-prf 角膜上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
月桂基鹽胰蛋白胨肉湯(LST) 300ml/袋*10 用于大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB、SN標準)
DNaseAgar
BM固體培養(yǎng)基 250g 用于醋酸鈣不動桿菌增菌培養(yǎng)
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