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m7G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD保存

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更新時(shí)間:2017-07-17 14:02:52瀏覽次數(shù):159次

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m7G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

m7G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD保存使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
m7G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
m7G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD保存DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒有必要。
m7G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD保存詳細(xì)說明書:

6,15-diketo-13,14-dihydro Prostaglandin F1α 500 ug     6,15-dioxo-9α,11α-dihydroxy-prostan-1-oic acid; 615-diketo-13,14-dihydro PGF1α; 615-diketo-13,14-dihydro Prostaglandin F1α

MMP Inhibitor II 1 mg     Matrix Metalloproteinase Inhibitor II|NHDDPC|PG 117025|PGE 4410186 hexahydro-N-hydroxy-1,3-bis[4-methoxyphenylsulfonyl]-5,5-dimethyl-2-pyrimidinecarboxamide

酵母提取物溶液(100ML     Yeast Extract Solution, 25% yeast extract solution. Sterile filtered.

Concanavalin A 50 mg     Concanavalin A

nitnotyrosine 1 g     3-nitno-L-tyrosine nitnotyrosine

8- Bromoadenosine- 3’, 5- cyclic monophosphate; cyclic 8- bromoadenosine- 3’, 5- monophosphate; 8- bromoadenosine- 3’, 5-Monophosphate     8-Br-cAMP
SMase Alkaline Phosphatase 1 ea     SMase Alkaline Phosphatase

Aurora激酶抑制劑 ZM-447439     ZM-447439 1 mg

trans-Zeatin 10 mg     2E-methyl-4-9H-purin-6-ylamino-2-buten-1-ol trans-Zeatin

4-methoxy PV9 hydrochloride 10 mg     4-MeO PV9|4-methoxy α-POP|para-methoxy PV9; 1-4-methoxyphenyl-2-pyrrolidin-1-yloctan-1-one, monohydrochloride

BB-22 3-carboxyindole metabolite 10 mg     1-cyclohexylmethyl-1H-indole-3-carboxylic acid BB-22 3-carboxyindole metabolite

ω-3 Arachidonic Acid methyl ester (50 mg)     ω-3 Arachidonic Acid methyl ester, 8Z,11Z,14Z,17Z-eicosatetraenoic acid, methyl ester
96-Well Strip Plate black 1 ea     96-Well Strip Plate black

Blonanserin     AD5423|Lonasen; 2-4-etxyl-1-piperazinyl-4-4-fluoropxenyl-5,6,7,8,9,10-hexaxy7no-cycloocta[b]pyridine

pH熒光探針Protonex Red 600     Protonex Red 600

D-α-xy7noxyglutaric Acid wo7ium salt 25 mg     D-2-HG|D-2-xy7noxyglutaric Acid; 2R-xy7noxy-pentanedioic acid, diwo7ium salt

9E),11E-Conjugated Linoleic Acid 100 mg     9E11E-octadecadienoic acid; 9E,11E-CLA|Isolinoleic Acid|Mangolds acid; 9E),11E-Conjugated Linoleic Acid

N-Cyclohexyl-N-metxyl-4-1,2-dixy7no-2-oxo-6-inoneolyloxybutyramide     Cilostamide
水稻赤霉菌培養(yǎng)基250g用于水稻中赤霉菌培養(yǎng)

脫脂奶粉 用于制備微生物培養(yǎng)基。該類培養(yǎng)基一般用于保存和增殖乳酸菌 500g incubation media 脫脂奶粉 用于制備微生物培養(yǎng)基。該類培養(yǎng)基一般用于保存和增殖乳酸菌 500g

地衣芽孢桿菌 產(chǎn)抗生素 /

HE瓊脂平板(9cm)用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)

DTM培養(yǎng)基 250g 用于食品中真菌的培養(yǎng)
AcidBorth

LPM瓊脂 LPM Agar 用于單增李氏菌選擇性分離(加入七葉苷和檸檬酸鐵銨)(FDA標(biāo)準(zhǔn))

Hektoen瓊脂培養(yǎng)基 Hektoen Enteric Agar 250 用于沙門氏菌屬和志賀菌屬的分離培養(yǎng)

細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基250用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)細(xì)菌總數(shù),培養(yǎng)24小時(shí),細(xì)菌顯紅色incubationmedia細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基250用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)細(xì)菌總數(shù),培養(yǎng)24小時(shí),細(xì)菌顯紅色

腸球菌瓊脂(膽汁七葉苷疊氮鈉瓊脂) 250g 用于食品和水中腸球菌的計(jì)數(shù)。
m7G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD保存SC瓊脂基礎(chǔ)250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng),需天極D-環(huán)絲酸和50%卵黃乳液(ISO標(biāo)準(zhǔn))

7.5肉湯 7.5% Sodium Chloride Broth 用于*的增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))

類桿菌-膽汁-七葉甙(BBE)瓊脂 BBE Agar 250 用于脆弱擬桿菌群的分離培養(yǎng)

馬鈴薯蔗糖瓊脂250g/瓶用于真菌的培養(yǎng)incubationmedia馬鈴薯蔗糖瓊脂250g/瓶用于真菌的培養(yǎng)

DesoxycholaactoseAgar

m7G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD保存變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合

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