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m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸

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更新時間:2017-07-17 14:02:11瀏覽次數(shù):112次

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m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸詳細(xì)說明書:

m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
615-diketo-13,14-dihydro Prostaglandin F1α 100 ug     6,15-dioxo-9α,11α-dihydroxy-prostan-1-oic acid; 6,15-diketo-13,14-dihydro PGF1α; 6,15-diketo-1314-dihydro Prostaglandin F1α

Dutasteride 50 mg     Avodart; N-[2,5-bistrifluoromethylphenyl]-2,4aR,4bS,5,6,6aS,7S,8,9,9aS,9bS,10,11,11aR-tetradecahydro-4a,6a-dimethyl-2-oxo-1H-indeno[5,4-f]inoneoline-7-carboxamide

酵母提取物(5KG     Yeast Extract 8013-01-5

Concanavalin A 250 mg     Concanavalin A

Sclerotiorin 500 ug     7-acetyloxy-5-chloro-3-[1E,3E5S-3,5-dimethyl-1,3-heptadien-1-yl]-7-methyl-6H-2-benzopyran-6,87H-dione; Sclerotiorin

8- Bromoadenosine- 3’, 5- cyclic monophosphate; cyclic 8- bromoadenosine- 3’, 5- monophosphate 8- bromoadenosine- 3’, 5-Monophosphate     8-Br-cAMP
SMase Enzyme Mixture 1 ea     SMase Enzyme Mixture

EpiMag 96孔高通量磁力分離器     EpiMag HT 96-Well Magnetic Separator 1/Pack

Neurodezine 50 mg     2-[5-3-chlorophenyl-2-furanyl]-4,5-bis4-methoxyphenyl-1H-imidazole; Neurodezine

4-methoxy PV9 hydrochloride 1 mg     4-MeO PV9|4-methoxy α-POP|para-methoxy PV9; 1-4-methoxyphenyl-2-pyrrolidin-1-yloctan-1-one, monohydrochloride

BB-22 3-carboxyindole metabolite 1 mg     1-cyclohexylmethyl-1H-indole-3-carboxylic acid; BB-22 3-carboxyindole metabolite

PDM 2 (500 mg)     PDM 2, 1,3-dichloro-5-[(1E)-2-(4-chlorophenyl)ethenyl]-benzene
96-Well Solid Plate black 1 ea     96-Well Solid Plate black

Blonanserin     AD5423|Lonasen; 2-4-etxyl-1-piperazinyl-4-4-fluoropxenyl-5,6,7,8,9,10-hexaxy7no-cycloocta[b]pyridine

RatioWorks BCFL, 琥珀酰亞胺酯 pH熒光探針BCECF的替代物     RatioWorks BCFL, SE Superior Replacement to BCECF

Bio-active Lipid II Screening Library 96-Well 100 ul     Bio-active Lipid II Screening Library 96-Well

9E),11E-Conjugated Linoleic Acid 10 mg     9E,11E-octadecadienoic acid; 9E11E-CLA|Isolinoleic Acid|Mangolds acid; 9E),11E-Conjugated Linoleic Acid

N-Cyclohexyl-N-metxyl-4-1,2-dixy7no-2-oxo-6-inoneolyloxybutyramide     Cilostamide
細(xì)菌L型增菌液65g用于L型細(xì)菌增菌培養(yǎng)

脫氧膽鹽檸檬酸鹽乳糖蔗糖瓊脂 incubation media 脫氧膽鹽檸檬酸鹽乳糖蔗糖瓊脂

TSA胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(大豆消化酪素瓊脂培養(yǎng)基) 250g 用于普通的或營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng),還用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室無菌程度的監(jiān)測及消毒劑消毒效果的...

F344大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基F344ratbonemarrowmesenchymalstemcellsintotheculturemediuminduceddifferentiationoffa
AmmoniumDextroseMedium

葡萄糖天門冬素培養(yǎng)基 250g 葡萄糖天門冬素培養(yǎng)基

霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基 Mould and Yeast Chromogenic Medium 1000ml 用于霉菌和酵母菌的顯色培養(yǎng)

細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基2000ml/瓶用于細(xì)菌總數(shù)測定,24h內(nèi)出結(jié)果,細(xì)菌呈紅色incubationmedia細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基2000ml/瓶用于細(xì)菌總數(shù)測定,24h內(nèi)出結(jié)果,細(xì)菌呈紅色

布氏肉湯添加劑(2ml/) 2ml/*5 添加于HBJ014
m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸蛋白胨水(靛基質(zhì)培養(yǎng)基)2供鑒別細(xì)菌能否產(chǎn)生靛基質(zhì)的生化反應(yīng)

7121-prf TM-prf 滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 7121-prf TM-prf 滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml

LaurylSulfateTryptoseBroth

腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基250g用于*腸毒素產(chǎn)毒試驗(yàn)

Iron瓊脂 250g 用于產(chǎn)

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