T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存-上海莼試生物技術(shù)有限公司

T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存產(chǎn)品及特點(diǎn)：
易錯(cuò) PCR（error-prone PCR）是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性，在一定條件下（如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在）能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法，則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下：本產(chǎn)品就是專(zhuān)門(mén)為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā)，本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1. 即開(kāi)即用，十分簡(jiǎn)單方便，尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，突變率穩(wěn)定，突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% （±0.13%），詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單，但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn)，則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體，也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR（sequential error-prone PCR），只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可，使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物，對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物，建議分段擴(kuò)增。
T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存變性溫度與時(shí)間：
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度，達(dá)不到變性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板，PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*， DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性，因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高，又會(huì)影響酶的活性。一般情況下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒，高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短，以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力，高變性溫度不宜超過(guò) 95℃。退火溫度與時(shí)間：退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng)，但過(guò)高則引物不能與模板牢固結(jié)合.
T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存DNA 擴(kuò)增效率下降；
溫度低產(chǎn)量高，但過(guò)低可造成引物與模板錯(cuò)配，非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的適退火溫度，可根據(jù)引物的（G+C）%含量進(jìn)行推測(cè)，一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引物的熔解溫度 Tm 低 5℃，退火時(shí)間一般為 30~60 秒，足以使引物與模板之間*結(jié) 合，長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存詳細(xì)說(shuō)明書(shū)：

T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次保存使用方法：
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例，如果反應(yīng)體系不是 30 uL，各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中，加入下列成分：易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板（10ng/uL） 1 uL PCR 引物(自備，10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶（5U/uL） 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR（循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表），然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件，一般可以先嘗試下面的 PCR 條件： PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘循環(huán) 30 次（見(jiàn)注） 72℃ 1 分鐘注：易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng)，也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
Δ17-6-keto Prostaglandin F1α （500 ug） 6-oxo-9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxy-prosta-13E，17Z-dien-1-oic acid； ω-3 6-keto PGF2α； Δ17-6-keto Prostaglandin F1α

Amodiainonee （50 mg） Camoinonee|Flavoinonee|NSC 13453|SN 10751； 4-[（7-chloro-4-inoneolinyl）amino]-2-[（diethylamino）methyl]-phenol

酵母提取物（1KG） Yeast Extract， 8013-01-3

FUB-PB-22 （10 mg） inoneolin-8-yl-1-（4-fluorobenzyl）-1H-indole-3-carboxylate； FUB-PB-22

Sclerotiorin （1 mg） 7-（acetyloxy）-5-chloro-3-[（1E，3E，5S）-3，5-dimethyl-1，3-heptadien-1-yl]-7-methyl-6H-2-benzopyran-6，8（7H）-dione； Sclerotiorin

N’-[2-[2-（4-Methoxyphenyl）ethenyl]-4-inoneazolinyl]-N，N-dimethyl-1，3-propanediamine Dihydrochloride CP-31398 Dihydrochloride
DPP Assay Substrate （1 ea） DPP Substrate； DPP Assay Substrate

銀杏酸 Ginkgolic acid （5 mg）

Neurodezine （10 mg） 2-[5-（3-chlorophenyl）-2-furanyl]-4，5-bis（4-methoxyphenyl）-1H-imidazole； Neurodezine

4-fluoro PV9 （hydrochloride）（1 mg） 4-fluoro α-POP|para-fluoro-PV9； 1-（4-fluorophenyl）-2-（pyrrolidin-1-yl）octan-1-one, monohydrochloride

N-pentanoic acid metabolite-d5 （500 ug） 5-（3-（2，2，3，3-tetramethyl-cyclopropanecarbonyl）-1H-indol-1-yl）pentanoic acid-2，4，5，6，7-d5； XLR11 N-pentanoic acid metabolite-d5； N-pentanoic acid metabolite-d5

N-Palmitoyl Taurine (50 mg) N-Palmitoyl Taurine, 2-[(1-oxohexadecyl)amino]-ethanesulfonic acid
96-Well Solid Plate （Colorimetric Assay）（100 ea） 96-Well Solid Plate （Colorimetric Assay）

L-（ 6-deoxy-L-Galactose； 6-deoxy-L-galactose

鈣離子指示探針Cal-520FF，鉀鹽 Cal-520FF， potewwium salt

Lutein （500 ug） E 161b|FloraGLO|Xanthophyll；（6’R）-β,ε-carotene-3R,3’R-diol

Phytanic Acid （25 mg） 3，7，11，15-tetrametxylhexadecanoic acid； Phytanic Acid

trans-4-[[（5S）-5-[[[3，5-bis（trifluorometxyl）pxenyl]metxyl]（2-metxyl-2H-tetrazol-5-yl）amino]-2，3，4，5-tetraxy7no-7，9-dimetxyl-1H-1-benzazepin-1-yl]metxyl]- cyclohexanecarboxylic acid； LY2484595 Evacetrapib
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)2222g用于水或食品中大腸菌群平板菌落計(jì)數(shù)(GB4789.3-2002)。