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天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴(kuò)增試劑盒20 次圖片

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更新時(shí)間:2017-07-17 13:58:28瀏覽次數(shù):165次

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天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴(kuò)增試劑盒20 次圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴(kuò)增試劑盒20 次圖片使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴(kuò)增試劑盒20 次圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴(kuò)增試劑盒20 次圖片DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒有必要。
天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴(kuò)增試劑盒20 次圖片詳細(xì)說(shuō)明書:

6-keto Prostaglandin F1α 50 mg     6-oxo-9α,11α,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid 6-keto PGF1α; 6-keto Prostaglandin F1α

Amodiainonee 10 mg     Camoinonee|Flavoinonee|NSC 13453|SN 10751; 4-[7-chloro-4-inoneolinylamino]-2-[diethylaminomethyl]-phenol

維生素B125GM     Vitamin B12 Cyanocobalamin), 68-19-9; MW: 1355.37; 98%; Cell Culture Tested

inoneolinic Acid 50 g     2,3-pyridinedicarboxylic acid NSC 13127|NSC 18836|NSC 403247; inoneolinic Acid

Linolein Hydroperoxides 5 mg     Linolein Hydroperoxides

33’,5,5-Tetramethylbenzidine TMBUS     TMB Ultrasensitive
DPP Assay Buffer 10X 1 ea     DPP Assay Buffer 10X

4-[[5-安基-1-2,6-二扶本甲酰基)-1H-1,24-三唑-3-]安基]本磺酰胺     Aurora A Inhibitor I 5 mg

2-Acetyl-5-tetrahydroxybutyl Imidazole 5 mg     1-[5-[1R,2S3R-1,2,34-tetrahydroxybutyl]-1H-imidazol-2-yl]-ethanone; 2-ATHBI|THI|2-Acetyl-4-tetrahydroxybutyl Imidazole; 2-Acetyl-5-tetrahydroxybutyl Imidazole

ADBICA N-5-hydroxypentyl metabolite 10 mg     N-1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl-1-5-hydroxypentyl-1H-indole-3-carboxamide

 N-pentanoic acid metabolite-d5 1 mg     5-3-2,2,3,3-tetramethyl-cyclopropanecarbonyl-1H-indol-1-ylpentanoic acid-2,4,5,6,7-d5; XLR11 N-pentanoic acid metabolite-d5;  N-pentanoic acid metabolite-d5

Tafluprost -free acid) (50 mg)     AFP-172, Tafluprost -free acid), 9.alpha.,11.alpha.-dihydroxy-15,15-difluoro-16-phenoxy-17,18,19,2-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
96-Well Cover Sheet 5 ea     EIA-Well Cover Sheets; 96-Well Cover Sheet

Prometxezine xy7nochloride 50 g     Diprazin|Fellozine|Lergigan|pxenergan|Romergan N,N,α-trimetxyl-10H-pxenothiezine-10-ethanamine, monoxy7nochloride

鈣離子指示探針Cal-520FF, AM     Cal-520FF, AM

15-epi Prostaglandin A1 500 ug     15-epi PGA1; 9-oxo-15R-xy7noxy-prosta-10,13E-dien-1-oic acid

R-Palmitoyl-2-metxyl Ethanolamide 50 mg     N-2R-xy7noxypropyl-hexadec* RP-2ME; R-Palmitoyl-2-metxyl Ethanolamide

Ac-His-Pro-Phe-Val-Statine-Leu-Phe-NH     Rat renin inhibitor peptide
緩沖蛋白胨水(緩沖胨水增菌液)(BPW)2350g用于沙門氏菌、阪崎腸桿菌的前增菌培養(yǎng)

通用啤酒瓊脂 (CM0651) Oxoid incubation media 通用啤酒瓊脂 (CM0651) Oxoid

土白蟻叢毛單胞菌 藥用菌、木腐菌。 /

MFC肉湯250g用于大腸菌群的濾膜法檢測(cè)

PLETAgarBase
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(YPD)250g用于測(cè)定酵母菌總數(shù)

乙酰胺酚紅瓊脂 Acetamide Agar 250 測(cè)定綠膿桿菌色素分離、培養(yǎng)

細(xì)菌L型分離瓊脂于L型細(xì)菌分離培養(yǎng)incubationmedia細(xì)菌L型分離瓊脂于L型細(xì)菌分離培養(yǎng)

臘樣芽孢桿菌選擇瓊脂基礎(chǔ) 250g 用于臘樣芽孢桿菌選擇性分離培養(yǎng)
天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴(kuò)增試劑盒20 次圖片三糖鐵瓊脂(TSI)22080250g用于鑒別腸道菌發(fā)酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)

7521-prf MSCM-acf-prf 間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 7521-prf MSCM-acf-prf 間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml

LactoseBileBroth

葡萄球菌增菌肉湯250g用于凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌的選擇性增菌

發(fā)光菌培養(yǎng)基 250g 用于發(fā)光菌的分離培養(yǎng)。

天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴(kuò)增試劑盒20 次圖片變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合

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