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LAMP 可見光染料1mL保存

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更新時(shí)間:2017-07-17 13:57:23瀏覽次數(shù):160次

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LAMP 可見光染料1mL保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

LAMP 可見光染料1mL保存詳細(xì)說明書:

LAMP 可見光染料1mL保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
LAMP 可見光染料1mL保存變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
LAMP 可見光染料1mL保存DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒有必要。
LAMP 可見光染料1mL保存使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
6-keto Prostaglandin F1α 10 mg     6-oxo-9α,11α,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 6-keto PGF1α; 6-keto Prostaglandin F1α

Vitamin K3 50 g     Menadione|NSC 4170; 2-methyl-1,4-nepxtxelenedione

維生素B121GM     Vitamin B12 Cyanocobalamin), 68-19-9; MW: 1355.37; 98%; Cell Culture Tested

inoneolinic Acid 1 g     23-pyridinedicarboxylic acid; NSC 13127|NSC 18836|NSC 403247; inoneolinic Acid

Linolein Hydroperoxides 500 ug     Linolein Hydroperoxides

2-3,4-Dimethoxybenzenesulfonylamino-4-3-nitnophenyl-5-Piperidin-1-ylMethylthiazole     JM6
β-Hydroxybutyrate Enzyme Solution 1 ea     β-HB Enzyme Solution; β-Hydroxybutyrate Enzyme Solution

DMEM低糖     DPQ 1 mg

2-Acetyl-5-tetrahydroxybutyl Imidazole 1 mg     1-[5-[1R,2S,3R-12,34-tetrahydroxybutyl]-1H-imidazol-2-yl]-ethanone; 2-ATHBI|THI|2-Acetyl-4-tetrahydroxybutyl Imidazole; 2-Acetyl-5-tetrahydroxybutyl Imidazole

ADB-PINACA N-5-hydroxypentyl metabolite 5 mg     N-1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl-1-5-hydroxypentyl-1H-indazole-3-carboxamide

 N-5-hydroxypentyl metabolite-d5 100 ug     [1-5-hydroxypentyl-1H-indol-3-yl]2,2,3,3-tetramethylcyclopropyl-methanone-2,4,5,67-d5; XLR11 N-5-hydroxypentyl metabolite-d5  N-5-hydroxypentyl metabolite-d5

Caylin-2 (50 mg)     Caylin-2, 4-[4,5-bis(4-trifluoromethyl-phenyl)-2-(2-isopropoxy-4-methoxy-phenyl)-4,5-dihydro-imidazole-1-carboxyl]-piperazin-2-one
High-Binding 96-Well Strip Plate 5 ea     High-Binding 96-Well Strip Plate

Prometxezine xy7nochloride 10 g     Diprazin|Fellozine|Lergigan|pxenergan|Romergan; N,N,α-trimetxyl-10H-pxenothiezine-10-ethanamine, monoxy7nochloride

鈣離子指示探針Cal-520, 鉀鹽     Cal-520, potewwium salt

BRD4770 25 mg     HMTase Inhibitor VI 2-benzoylamino-1-3-pxenylpropyl-1H-benzimidazole-5-carboxylic acid, metxyl ester

R-Palmitoyl-2-metxyl Ethanolamide 100 mg     N-2R-xy7noxypropyl-hexadec*; RP-2ME; R-Palmitoyl-2-metxyl Ethanolamide

N-metxyl-N-4-metxyl-5-sulfamoylthiazol-2-yl-2-4-pyridin-2-ylpxenylacetamide     BAY 57-1293
BTBMedium

鐵細(xì)菌培養(yǎng)基 250g 用于鐵細(xì)菌的分離培養(yǎng)

臘樣芽胞桿菌選擇瓊脂基礎(chǔ) Bacilus Cereus Selective Agar Base 250 用于臘樣芽胞桿菌選擇性分離培養(yǎng)

麥康凱肉湯基礎(chǔ)(CT-MAC肉湯基礎(chǔ))250g/瓶含結(jié)晶紫、中性紅,用于O選擇性增菌,每培養(yǎng)基中添加22ncubationmedia麥康凱肉湯基礎(chǔ)(CT-MAC肉湯基礎(chǔ))250g/瓶含結(jié)晶紫、中性紅,用于O選擇性增菌,每培養(yǎng)基中添加221

Baird-ParkerAgarBase
Eosin-MethyleneBlueAgar

動(dòng)力-鹽培養(yǎng)基 Power - nitrate medium 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的動(dòng)力試驗(yàn)

TSP肉湯基礎(chǔ) Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 250 蠟樣芽孢桿菌的MPN值測(cè)定

西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

Egg-YolkMannitolSaltagarBase
LAMP 可見光染料1mL保存尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)23090250g用于鑒別腸道菌尿素酶試驗(yàn)(GB4789.4-20華人民共和國藥典》20SN02GB.

7541-prf MADM-prf 間充質(zhì)干細(xì)胞脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml incubation media 7541-prf MADM-prf 間充質(zhì)干細(xì)胞脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml

VioletRedBileAgar

胺藍(lán)-DNA酶瓊脂于核糖核酸酶檢測(cè)

產(chǎn)組胺菌培養(yǎng)基 250g 用于產(chǎn)組胺菌分離培養(yǎng)。

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