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更新時(shí)間:2017-07-17 13:56:52瀏覽次數(shù):116次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)高 GC 革氏陽(yáng)性細(xì)菌 PCR Mix 5100 次圖片
古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存
LAMP 擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照50 次運(yùn)輸使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
LAMP 擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照50 次運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
LAMP 擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照50 次運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒有必要。
LAMP 擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照50 次運(yùn)輸詳細(xì)說明書:
6-keto Prostaglandin F1α (1 mg) 6-oxo-9α,11α,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 6-keto PGF1α; 6-keto Prostaglandin F1α
Vitamin K3 (250 g) Menadione|NSC 4170; 2-methyl-1,4-nepxtxelenedione
鹽酸*(5GM) Vancomycin, HCl, 1404-93-9; MW 1485.71; ≥590ug/mg
Rabeprazole (sodium salt) (50 mg) 2-[[[4-(3-methoxypropoxy)-3-methyl-2-pyridinyl]methyl]sulfinyl]-1H-benzimidazole, monosodium salt; Aciphex
Hydroxy Linoleins (50 mg) Hydroxy Linoleins
Dithiothreitol DTT
β-Hydroxybutyrate Standard (1 ea) β-Hydroxybutyrate Standard; β-Hydroxybutyrate Standard
毛殼素 Chaetocin (200 ug)
3-hexanoyl-NBD Cholesterol (500 ug) 6-[(7-nitno-2,1,3-benzoxadial-4-yl)amino]-cholest-5-en-3-ol; 3-C6-NBD Cholesterol; 3-hexanoyl-NBD Cholesterol
ADB-PINACA N-(5-hydroxypentyl) metabolite (10 mg) N-(1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)-1-(5-hydroxypentyl)-1H-indazole-3-carboxamide
N-(5-hydroxypentyl) metabolite-d5 (1 mg) [1-(5-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl](2,2,3,3-tetramethylcyclopropyl)-methanone-2,4,5,6,7-d5; XLR11 N-(5-hydroxypentyl) metabolite-d5; N-(5-hydroxypentyl) metabolite-d5
Stearidonic Acid methyl ester (25 mg) Moroctic Acid methyl ester, Stearidonic Acid methyl ester, 6Z,9Z,12Z,15Z-octadecatetraenoic acid, methyl ester
High-Binding 96-Well Strip Plate (100 ea) High-Binding 96-Well Strip Plate
Biochanin A (250 mg) 4’-metxyl Genistein|5,7-dixy7noxy-4’-metxoxyisoflavone|NSC 123538; 5,7-dixy7noxy-3-(4-metxoxypxenyl)-4H-1-benzopyran-4-one
新型鈣離子熒光探針Fluo-8, 鉀鹽 Fluo-8, potewwium salt
CAY10568 (25 mg) Santinamide; trimetxyl[(pxenylcarbamoyl)metxyl]-ammonium iodide
R-Palmitoyl-(2-metxyl) Ethanolamide (10 mg) N-(2R-xy7noxypropyl)-hexadec*; RP-2ME; R-Palmitoyl-(2-metxyl) Ethanolamide
N-metxyl-N-(4-metxyl-5-sulfamoylthiazol-2-yl)-2-(4-(pyridin-2-yl)pxenyl)acetamide BAY 57-1293
MKTTnBroth
鐵瓊脂 250g 用于產(chǎn)硫化氫細(xì)菌計(jì)數(shù)
霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA) 250 用于霍亂弧菌的生化試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
改良LMX肉湯2萬(wàn)ml/瓶用于同時(shí)快速檢測(cè)大腸桿菌、大腸菌群,24h內(nèi)出結(jié)果incubationmedia改良LMX肉湯2萬(wàn)ml/瓶用于同時(shí)快速檢測(cè)大腸桿菌、大腸菌群,24h內(nèi)出結(jié)果
含*酶接觸皿培養(yǎng)基平板(6.5cm) 10個(gè)/包 用于環(huán)境、器皿、設(shè)備和表面的無菌檢測(cè)
EB增菌液凍干配套試劑SR0090支添加于225ml(0260成EB增菌液。
Mueller-Hinton 瓊脂 (CM0337) Oxoid incubation media Mueller-Hinton 瓊脂 (CM0337) Oxoid
繩狀青霉 溶菌試驗(yàn) 支/瓶
西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂250g用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
AgarmediumK(Xylose,lysine,deoxycholateagar)
LAMP 擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照50 次運(yùn)輸緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培養(yǎng)基、磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基)2250g用于MR和VP試驗(yàn)
7551-prf MCDM-prf 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml incubation media 7551-prf MCDM-prf 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml
亞西酸鹽*增菌液(SC) 300ml/袋*10 用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
ToluidineBlueDNAseAgar
HistamineproducingbacteriaMedium
LAMP 擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照50 次運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合
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