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更新時間:2017-07-17 13:56:24瀏覽次數(shù):82次
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通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次圖片產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次圖片使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
3-methoxy Prostaglandin F1α (5 mg) 3-methoxy-9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prost-13Z-en-1-oic acid; 3-methoxy PGF1α; 3-methoxy Prostaglandin F1α
Vitamin K3 (25 g) Menadione|NSC 4170; 2-methyl-1,4-nepxtxelenedione
鹽酸*(1GM) Vancomycin, HCl, 1404-93-9; MW 1485.71; ≥590ug/mg
Rabeprazole (sodium salt) (5 mg) 2-[[[4-(3-methoxypropoxy)-3-methyl-2-pyridinyl]methyl]sulfinyl]-1H-benzimidazole, monosodium salt; Aciphex
Hydroxy Linoleins (5 mg) Hydroxy Linoleins
(2S,3R)-3-(3,4-Difluorophenyl)-2-(4-fluorophenyl)-4-hydroxy-N-((3S)-2-oxo-5-phenyl-2,3-1H-benzo[e][1,4]diazepin-3-yl)butyramide] Compound 34
β-Hydroxybutyrate Assay Buffer (1 ea) β-HB Assay Buffer; β-Hydroxybutyrate Assay Buffer
BIX 01294 三鹽酸鹽水合物 BIX 01294 trihydrochloride hydrate (1 mg)
3-hexanoyl-NBD Cholesterol (5 mg) 6-[(7-nitno-2,1,3-benzoxadial-4-yl)amino]-cholest-5-en-3-ol; 3-C6-NBD Cholesterol; 3-hexanoyl-NBD Cholesterol
ADB-PINACA N-(5-hydroxypentyl) metabolite (1 mg) N-(1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)-1-(5-hydroxypentyl)-1H-indazole-3-carboxamide
N-(4-hydroxypentyl) metabolite-d5 (500 ug) (1-(4-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl)(2,2,3,3-tetramethylcyclopropyl)methanone-2,4,5,6,7-d5; N-(4-hydroxypentyl) metabolite-d5
Caylin-1 (50 mg) Caylin-1, 4-[4,5-bis(3,4-chlorophenyl)-2-(2-isopropoxy-4-methoxy-phenyl)-4,5-dihydro-imidazole-1-carboxyl]-piperazin-2-one
High-Binding 96-Well Solid Plate (5 ea) High-Binding 96-Well Solid Plate
Biochanin A (100 mg) 4’-metxyl Genistein|5,7-dixy7noxy-4’-metxoxyisoflavone|NSC 123538; 5,7-dixy7noxy-3-(4-metxoxypxenyl)-4H-1-benzopyran-4-one
新型鈣離子熒光探針Fluo-8, 鈉鹽 Fluo-8, wo7ium salt
Olanzapine (100 mg) 2-metxyl-4-(4-metxyl-1-piperazinyl)-10H-thieno[2,3-b][1,5]benzodiazepine; Zyprexa ; Olanzapine
R-Palmitoyl-(1-metxyl) Ethanolamide (500 mg) N-(2-xy7noxy-1R-metxyletxyl)-hexadec*; R-1 PMA; R-Palmitoyl-(1-metxyl) Ethanolamide
(S)-3-(4-metxoxypxenyl)-N-((S)-1-((R)-2-metxyloxiran-2-yl)-1-oxo-3-pxenylpropan-2-yl)-2-((S)-2-(2-morpholinoacetamido)propanamido)prop*; PR-957 ONX-0914
BacillusBacteriaMedium
鐵瓊脂 250g 用于產(chǎn)硫化氫細菌計數(shù)
改良番茄汁培養(yǎng)基 Tomato Juice Agar,Modified 250 用于食品中乳酸菌總數(shù)測定
假單胞菌分離瓊脂250g/瓶用于假單胞菌的檢驗incubationmedia假單胞菌分離瓊脂250g/瓶用于假單胞菌的檢驗
ModifiedCCDAAgar
膽汁液態(tài)培養(yǎng)基28365用于飲用天然礦泉水中糞鏈球菌濾膜法的確證實驗。(GB/T8538-2008)
YM Broth 培養(yǎng)基 250g incubation media YM Broth 培養(yǎng)基 250g
圓酵毛殼 利用D-木糖產(chǎn)酒精 支/瓶
西蒙氏枸櫞酸鹽培養(yǎng)基250g用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(GB標準)
BCYE-CyeAgarBase
通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次圖片Koser氏枸櫞酸鹽肉湯2200g用于細菌的枸櫞酸鹽的試驗。
7611-prf MEpiCM-prf 上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 7611-prf MEpiCM-prf 上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
SeleniteCystineBroth
*鹽瓊脂250g用于*的選擇性分離培養(yǎng)
脫脂奶蔗糖胰蛋白胨瓊脂 250g 用于致病性嗜水氣單胞菌的鑒別培養(yǎng)
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