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單孢子全基因組擴增試劑盒30 次運輸

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更新時間:2017-07-17 13:55:03瀏覽次數(shù):119次

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單孢子全基因組擴增試劑盒30 次運輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

單孢子全基因組擴增試劑盒30 次運輸詳細說明書:

單孢子全基因組擴增試劑盒30 次運輸產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
單孢子全基因組擴增試劑盒30 次運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
單孢子全基因組擴增試劑盒30 次運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
單孢子全基因組擴增試劑盒30 次運輸使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
23-dinor-6-keto Prostaglandin F1α sodium salt 5 mg     6-oxo-9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-2,3-dinor-prost-13E-en-1-oic acid sodium salt; 2,3-dinor-6-keto PGF1α sodium salt); 2,3-dinor-6-keto Prostaglandin F1α sodium salt

Clonidine hydrochloride 5 g     Catapres|Kapvay|ST 155 N-2,6-dichlorophenyl-4,5-dihydro-1H-imidazol-2-amine, monohydrochloride

胰蛋白胨(2.5KG     Tryptone, Tryptic digest of casein.

XLR12 5 mg     2,23,3-tetramethylcyclopropyl[1-4,4,4-trifluorobutyl-1H-indol-3-yl]-methanone XLR12

Hydroxymethyl Uracil 5 g     5-hydroxymethyl-2,41H,3H-pyrimidinedione Hydroxymethyl Uracil

YPAC Cocktail Set 1000X     StemBoost YPAC Cocktail Set 1000X), Sterile-Filtered
MPO Inhibitor 1 ea     MPO Inhibitor

*標記單甲基化組蛋白H3K79多肽     Biotinylated Monomethyl Histone H3K79 Peptide 100 ul

3-dodecanoyl-NBD Cholesterol 5 mg     12-[7-nitno-2,13-benzoxadiazol-4-ylamino]-3S,10R,13R-3-methoxy-10,13-dimethyl-17-((R-6-methylheptan-2-yl-tetradecahydro-1H-cyclopenta[α]e; 3-C12-NBD Cholesterol 3-dodecanoyl-NBD Cholesterol

AKB48 exempt preparation 1 mg     APINACA; 1-pentyl-N-tricyclo[3.3.1.13,7]dec-1-yl-1H-indazole-3-carboxamide

AM694 N-pentanoic acid metabolite-d5 1 mg     5-3-2-iodobenzoyl-1H-indol-1-yl-24,56,7-d5pentanoic acid AM694 N-pentanoic acid metabolite-d5

Prostaglandin E2 FPIA Standard - Red (1 ea)     PGE2 Fluorescence Polarization Immunoassay Standard - Red, Prostaglandin E2 FPIA Standard - Red
Precoated Goat Anti-Mouse IgG EIA 96-Well Strip Plate 1 ea     Precoated Goat Anti-Mouse IgG EIA 96-Well Strip Plate

Trimetxoprim 5 g     Trimpex; 5-[3,4,5-trimetxoxypxenylmetxyl]-2,4-pyrimidinediamine

DAX-J2 IR     DAX-J2 IR

Topiramate 1 g     2,3:4,5-bis-O-1-metxyletxylidene-β-D-fructopyranose 1-sulfamate; Topamax |TPM|Epitomax|McN 4853|RWJ 17021; Topiramate

R-Palmitoyl-1-metxyl Ethanolamide 10 mg     N-2-xy7noxy-1R-metxyletxyl-hexadec*; R-1 PMA R-Palmitoyl-1-metxyl Ethanolamide

N-[1-metxyl-4-piperidinylmetxyl]-3-[3-trifluorometxoxypxenyl]imidazo[1,2-b]pyridazin-6-amine     SGI-1776
普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2)250g分離培養(yǎng)霍亂弧菌,*檢定用

*瓊脂基礎 250(g) incubation media *瓊脂基礎 250(g)

OXA基礎 Oxford Agar Base 250 單增李氏菌的選擇性分離

嗜鹽菌選擇性瓊脂250用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標準)incubationmedia嗜鹽菌選擇性瓊脂250用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標準)

ShigiellaBroth
四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基(TTB)250g用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)

氨芐*麥康凱瓊脂基礎 250(g) incubation media 氨芐*麥康凱瓊脂基礎 250(g)

厭氧肉肝湯 Anaerobic Beef Liver Broth 250 供一般厭氧菌培養(yǎng)及其制備檢驗用

戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎250用于炭疽桿菌的培養(yǎng)及初步鑒定incubationmedia戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎250用于炭疽桿菌的培養(yǎng)及初步鑒定

脫纖維羊血 50ml 100mlHB0251中加入7ml脫纖維羊血
單孢子全基因組擴增試劑盒30 次運輸YGCAgar

A1培養(yǎng)基 250(g) incubation media A1培養(yǎng)基 250(g)

雙洗瓊脂平板 雙洗瓊脂平板 10

強化梭菌瓊脂250用于梭菌的分離培養(yǎng)(MERCK方法)incubationmedia強化梭菌瓊脂250用于梭菌的分離培養(yǎng)(MERCK方法)

3%堿性蛋白胨水 250g 用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng)

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