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石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次圖片

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更新時(shí)間:2017-07-17 13:54:32瀏覽次數(shù):168次

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石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次圖片使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專(zhuān)門(mén)為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次圖片DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次圖片詳細(xì)說(shuō)明書(shū):

23-dinor-6-keto Prostaglandin F1α sodium salt 1 mg     6-oxo-9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-2,3-dinor-prost-13E-en-1-oic acid sodium salt; 2,3-dinor-6-keto PGF1α sodium salt); 2,3-dinor-6-keto Prostaglandin F1α sodium salt

Clonidine hydrochloride 1 g     Catapres|Kapvay|ST 155; N-2,6-dichlorophenyl-4,5-dihydro-1H-imidazol-2-amine, monohydrochloride

胰蛋白胨(1KG     Tryptone Tryptic digest of casein.

XLR12 10 mg     2,23,3-tetramethylcyclopropyl[1-4,44-trifluorobutyl-1H-indol-3-yl]-methanone; XLR12

Hydroxymethyl Uracil 250 mg     5-hydroxymethyl-2,41H,3H-pyrimidinedione Hydroxymethyl Uracil

Reprogramming Cocktail Set II 1000X     StemBoost Reprogramming Cocktail Set II 1000X), Sterile-Filtered
Myeloperoxidase Control 1 ea     Myeloperoxidase Control

24-比啶二羧酸一水合物     2,4 pyridindicarboxylic acid hydrate 1 g

3-dodecanoyl-NBD Cholesterol 1 mg     12-[7-nitno-2,1,3-benzoxadiazol-4-ylamino]-3S,10R,13R-3-methoxy-10,13-dimethyl-17-((R-6-methylheptan-2-yl-tetradecahydro-1H-cyclopenta[α]e; 3-C12-NBD Cholesterol; 3-dodecanoyl-NBD Cholesterol

XLR11 exempt preparation 1 mg     5-fluoro 1-5-fluoropentyl-1H-indol-3-yl)(2,2,3,3-tetramethylcyclopropylmethanone

JWH 398 N-pentanoic acid metabolite-d5 500 ug     5-3-4-chloro-1-naphthoyl-1H-indol-1-yl-2,45,6,7-d5pentanoic acid; JWH 398 N-5-carboxypentyl metabolite-d5 JWH 398 N-pentanoic acid metabolite-d5

Prostaglandin E2 FPIA Reagent - Red (400 dtn)     PGE2 Fluorescence Polarization Immunoassay Reagent - Red, Prostaglandin E2 FPIA Reagent - Red
Precoated Goat Anti-Mouse IgG EIA 96-Well Solid Plate 5 ea     Precoated Goat Anti-Mouse IgG EIA 96-Well Solid Plate

Trimetxoprim 25 g     Trimpex; 5-[3,4,5-trimetxoxypxenylmetxyl]-2,4-pyrimidinediamine

DAX-J2 Red     DAX-J2 Red

Leukotriene B4 Luminex Standard 1 ea     LTB4 Luminex Standard Leukotriene B4 Luminex Standard

Palmitoyl Ethanolamide 50 mg     N-2-xy7noxyetxyl-hexadec*; PEA|Palmidrol Palmitoyl Ethanolamide

7-metxoxy-4-((6-pxenyl-[1,2,4]triazolo[43-b]pyridazin-3-ylmetxoxyinoneoline     AMG-208
中國(guó)藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基2350g用于沙門(mén)氏菌的前增菌培養(yǎng)(GB4789.4-20B4789.40-2002GB-9標(biāo)準(zhǔn))...

碳瓊脂基礎(chǔ) (CM0119) Oxoid incubation media 碳瓊脂基礎(chǔ) (CM0119) Oxoid

淺灰鏈霉菌杭州變種 產(chǎn)抗真菌的*。 /

StandardINutrientAgar

XLD瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于沙門(mén)氏菌的選擇性分離培養(yǎng)
SodiumluriteBrothBase

蔗糖胰蛋白胨肉湯 250(g) incubation media 蔗糖胰蛋白胨肉湯 250(g)

甲苯胺藍(lán)-DNA酶瓊脂 Toluidine Blue-O-Dnase Agar 100 用于核糖核酸酶測(cè)定

戊烷脒50mg加入戊烷脒多粘菌素瓊脂incubationmedia戊烷脒50mg加入戊烷脒多粘菌素瓊脂

225mL胰酪胨大豆多粘菌素肉湯均質(zhì)袋 10個(gè)/ 用于蠟樣芽孢桿菌的檢測(cè)
石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次圖片丙酸鹽(枯草芽孢桿菌)20支用于枯草芽孢桿菌生化試驗(yàn)

A1培養(yǎng)基 A1 Medium 用于檢測(cè)水中的大腸菌US-EPA標(biāo)準(zhǔn))

血液* Blood Enrichment Medium 250 用于從血液中分離病原菌

馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂250g/瓶用于椰毒假單胞菌酵米面亞種檢驗(yàn)incubationmedia馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂250g/瓶用于椰毒假單胞菌酵米面亞種檢驗(yàn)

改良麥康凱肉湯(CT-MAC) 250g 用于O157選擇性增菌培養(yǎng)

石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次圖片變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合

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