當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>核酸擴(kuò)增產(chǎn)品>> 單酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (Tth)50 次圖片
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更新時間:2017-07-17 13:49:14瀏覽次數(shù):159次
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古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存
單酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (Tth)50 次圖片產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
單酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (Tth)50 次圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
單酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (Tth)50 次圖片DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測,一般實驗中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
單酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (Tth)50 次圖片詳細(xì)說明書:
單酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (Tth)50 次圖片使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
Prostaglandin F1α (5 mg) 9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; PGF1α; Prostaglandin F1α
JNK Inhibitor VIII (10 mg) c-Jun N-terminal Kinase Inhibitor VIII; N-(4-amino-5-cyano-6-ethoxy-2-pyridinyl)-2,5-dimethoxy-benzeneacetamide
Tris堿(1KG) TRIS Base, 77-86-1; MW 121.13; Molecular Biology Grade
Vardenafil (hydrochloride hydrate) (50 mg) 2-[2-ethoxy-5-[(4-ethyl-1-piperazinyl)sulfonyl]phenyl]-5-methyl-7-propyl-imidazo[5,1-f][1,2,4]triazin-4(1H)-one, monohydrochloride trihydrate; Vardenafil (hydrochloride hydrate)
8-hydroxy Guanosine (25 mg) 8-hydroxy-guanosine; 8-hydroxy Guanosine
Stem Cell Fate Regulator Set VI DiscoveryPak Stem Cell Fate Regulator Set VI
Methyltransferase Fluorometric Mixture (1 ea) MT Fluorometric Mixture; Methyltransferase Fluorometric Mixture
磷酸化組蛋白H3S28多肽 Phospho Histone Ser28 Peptide (100 ul)
N-3-oxo-tetradec-7(Z)-enoyl-L-Homoserine lactone (25 mg) 3-oxo-N-[(3S)-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-7-tetradecenamide; 3-oxo-C14:1-Δ7cis-(L)-HSL; N-3-oxo-tetradec-7(Z)-enoyl-L-Homoserine lactone
Ac-VEID-AMC (1 mg) Caspase-6 Substrate (Fluorogenic)|N-Acetyl-Val-Glu-Ile-Asp-7-amido-4-Methylcoumarin; N-acetyl-L-valyl-L-α-glutamyl-L-isoleucyl-N-(4-methyl-2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl)-L-α-asparagine
JWH 203 N-pentanoic acid metabolite-d5 (1 mg) 5-(3-(2-(2-chlorophenyl)acetyl)-1H-indol-1-yl)pentanoic acid-2,4,5,6,7-d5; JWH 203 N-pentanoic acid metabolite-d5
dNTP Mix (1 ml) dNTP Mix (1 ml)
Precoated (Mouse Anti-Rabbit IgG) EIA 96-Well Strip Plate (5 ea) Precoated (Mouse Anti-Rabbit IgG) EIA 96-Well Strip Plate
Danazol (250 mg) Danocrine|Ladogal|NSC 270916|WIN 17,757; pregna-2,4-dien-20-yno[2,3-d]isoxazol-17α-ol
FAM-VAD-FMK FAM-VAD-FMK
Ketorolac (500 mg) 5-benzoyl-2,3-dixy7H-pyrrolizine-1-carboxylic acid; Acular LS |Acular PF |RS 37619|Sprix ; Ketorolac
Heptadecanoyl Ethanolamide (50 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-heptadec*; Heptadecanoyl Ethanolamide
4-(2-Chloropxenoxy)-N-(3-(3-metxylcarbamoyl)pxenyl)pipeni7ine-1-carboxamide EZSolution SCD1 Inhibitor
TIN0Broth
酸化K氏培養(yǎng)基 250g 用于果汁和濃縮果汁中環(huán)脂芽孢桿菌和其它的耐熱耐酸菌的檢測的。
DRBC瓊脂 DRBC Agar 250 用于食品中霉菌及酵母菌分離培養(yǎng)
4-甲基傘形酮葡糖苷酸(MUG)培養(yǎng)基2000ml/瓶用于大腸埃希氏菌檢驗incubationmedia4-甲基傘形酮葡糖苷酸(MUG)培養(yǎng)基2000ml/瓶用于大腸埃希氏菌檢驗
NutrientAgar
vitaminK1
嗜鹽性試驗用胰胨水 Halophilic experimental medium 用于弧菌的嗜鹽試驗
蛋白胨E Gelatin Peptone 250克 BR
無機(jī)鹽淀粉瓊脂ISPMedium4(InorganicSalts-StarchAgar)250g/瓶用于鏈霉菌屬的培養(yǎng)鑒定incubationmedia無機(jī)鹽淀粉瓊脂ISPMedium4(InorganicSalts-StarchAgar)250g/瓶用于鏈霉菌屬的培養(yǎng)鑒定
E.coliChromogenicMedium
單酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (Tth)50 次圖片胰化大豆瓊脂2807g用于普通的或營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng),還用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室無菌程度的監(jiān)測。
Agar D (Purified Agar) 純化瓊脂 500g incubation media Agar D (Purified Agar) 純化瓊脂 500g
香蕉枯萎病 支/瓶
MethylRedVogesProskauerBroth
Povidone-iodine(liquid)
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