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6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL運(yùn)輸

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更新時(shí)間:2017-07-17 13:47:59瀏覽次數(shù):147次

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6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL運(yùn)輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 )0.5mM100μL運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時(shí)間退火沒有必要。
6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 )0.5mM100μL運(yùn)輸詳細(xì)說明書:

6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL運(yùn)輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
17-trans Prostaglandin E3 50 ug     9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-prosta-5Z13E,17E-trien-1-oic acid 17-trans PGE3; 17-trans Prostaglandin E3

SMAD3 Inhibitor, SIS3 5 mg     1-3,4-dihydro-6,7-dimethoxy-21H-isoinoneolinyl-3-1-methyl-2-phenyl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl-2-propen-1-one

*(25GM     Timentin, 15:1 Ticarcillin Disodium Salt / potewwium Clavulanate Mixture

Vardenafil hydrochloride hydrate 10 mg     2-[2-ethoxy-5-[4-ethyl-1-piperazinylsulfonyl]phenyl]-5-methyl-7-propyl-imidazo[5,1-f][12,4]triazin-41H-one, monohydrochloride trihydrate Vardenafil hydrochloride hydrate

8-hydroxy Guanine hydrochloride 50 mg     2-amiH-purine-6,8-dione monohydrochloride; 8-Oxoguanine|NSC 22728-hydroxy Guanine hydrochloride

EGFR Signaling Inhibitor Panel PathwayReady     PathwayReady EGFR Signaling Inhibitor Panel
Methyltransferase Colorimetric Mixture 1 ea     MT Colorimetric Mixture; Methyltransferase Colorimetric Mixture

HRP標(biāo)記的鏈霉親和素     Streptavidin: HRP Conjugate 0。5 ml

Pimelic Diphenylamide 106 5 mg     N1-2-aminophenyl-N7-4-methylphenyl-heptanediamide; TC-H 106|Histone Deacetylase Inhibitor VII; Pimelic Diphenylamide 106

Ac-VDVAD-AFC 1 mg     Caspase-2 Substrate Fluorogenic|N-Acetyl-Val-Asp-Val-Ala-Asp-7-amido-4-Trifluoromethylcoumarin; N-

JWH 203 N-5-hydroxypentyl metabolite-d5 1 mg     2-2-chlorophenyl-1-1-5-hydroxypentyl-1H-indol-3-ylethan-1-one-2,4,5,67-d5; JWH 203 N-5-hydroxypentyl metabolite-d5

17-phenyl trinor Prostaglandin F2α ethyl amide (10 mg)     .,15S-trihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-amide 17-phenyl trinor PGF2α ethyl amide|15(S)-Bimatoprost|Bimatoprost; 17-phenyl trinor Prostaglandin F2α ethyl amide
Mouse Monoclonal Anti-Rabbit IgG 2500 dtn     Mouse Monoclonal Anti-Rabbit IgG

MTSSL 10 mg     2,5-dixy7no-2,2,5,5-tetrametxyl-3-[[metxylsulfonylthio]metxyl]-1H-pyrrol-1-yloxy

Z-DEVD-ProRed 620     Z-DEVD-ProRed 620

Valganciclovir xy7nochloride 10 mg     2-[2-ami,6-dixy7no-6-oxo-9H-purin-9-ylmetxoxy]-3-xy7noxypropyl ester L-valine, monoxy7nochloride Ro 107-9070/194|Valcyte ; Valganciclovir xy7nochloride

Heptadecanoyl Ethanolamide 10 mg     N-2-xy7noxyetxyl-heptadec*; Heptadecanoyl Ethanolamide

Ac-LLnL-CHO MG-101, N-Acetyl-L-leucyl-L-leucyl-L-norleucinal N-Acetyl-Leu-Leu-Nle-al     tor I, ALLN
LetheenBroth

四環(huán)素檢定瓊脂 250(g) incubation media 四環(huán)素檢定瓊脂 250(g)

霍亂雙糖鐵瓊脂 Kligler Iron Agar 250 用于霍亂、副溶弧菌的分離培養(yǎng)

改良MSRV培養(yǎng)基250用于沙門氏的分離培養(yǎng)(MERCK方法)incubationmedia改良MSRV培養(yǎng)基250用于沙門氏的分離培養(yǎng)(MERCK方法)

M-肉湯 250g 用于干燥食品和種子中沙門氏菌增菌培養(yǎng)
Mueller-Hinton瓊脂(MHA)250g用于彎曲桿菌的藥物敏感性試驗(yàn)

阪崎桿菌顯色培養(yǎng)基 Enterobacter Sakazakii Chromogenic Medium 用于阪崎桿菌的顯色培養(yǎng),阪崎桿菌顯藍(lán)色,其它腸桿菌顯無色

EB增菌液 EB Enrichment Broth 250 用于單增李氏菌選擇性增菌培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))

我妻氏血瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于副溶血性弧菌神奈川試驗(yàn),每培養(yǎng)基中需添加5ml5070ubationmedia我妻氏血瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于副溶血性弧菌神奈川試驗(yàn),
6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 )0.5mM100μL運(yùn)輸MiddleBrook7H250g用于分枝桿菌的分離培養(yǎng)

Agar GASSNER Water-blue metachrome-yellow lactose agar acc.to GASSNER GASSNER 瓊脂/水溶藍(lán)偏烙黃乳糖瓊脂 1.01282.0500 MERCK默克 incubation media Agar GASSNER Water-blue metachrome-yellow lactose agar acc.to GASSNER GASSNER 瓊脂/水溶藍(lán)偏烙黃乳糖瓊脂 1.01

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