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10nt 隨機(jī)引物,0.5μg/μL5μg圖片

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更新時(shí)間:2017-07-17 13:47:32瀏覽次數(shù):137次

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10nt 隨機(jī)引物,0.5μg/μL5μg圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

10nt 隨機(jī)引物,0.5μg/μL5μg圖片詳細(xì)說(shuō)明書:

10nt 隨機(jī)引物,0.5μg/μL5μg圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
10nt 隨機(jī)引物,0.5μg/μL5μg圖片變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
10nt 隨機(jī)引物,0.5μg/μL5μg圖片DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
10nt 隨機(jī)引物,0.5μg/μL5μg圖片使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
17-trans Prostaglandin E3 1 mg     9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E,17E-trien-1-oic acid; 17-trans PGE3; 17-trans Prostaglandin E3

SMAD3 Inhibitor, SIS3 1 mg     1-3,4-dihydro-6,7-dimethoxy-21H-isoinoneolinyl-3-1-methyl-2-phenyl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl-2-propen-1-one

*(1GM     Timentin, 15:1 Ticarcillin Disodium Salt / potewwium Clavulanate Mixture

MIF Antagonist 5 mg     4,5-dihydro-3-4-hydroxyphenyl-5-isoxazoleacetic acid, methyl ester; Macrophage Migration Inhibitory Factor|ISO-1; MIF Antagonist

8-hydroxy Guanine hydrochloride 25 mg     2-amiH-purine-6,8-dione monohydrochloride 8-Oxoguanine|NSC 22728-hydroxy Guanine hydrochloride

MAP Kinase Signaling Inhibitor Panel, PathwayReady     PathwayReady MAP Kinase Signaling Inhibitor Panel
Methyltransferase Enzyme Mixture 1 ea     MT Enzyme Mixture Methyltransferase Enzyme Mixture

*標(biāo)記單甲基化組蛋白H3K9多肽     Biotinylated Monomethyl Histone H3K9 Peptide 200 ul

Pimelic Diphenylamide 106 25 mg     N1-2-aminophenyl-N7-4-methylphenyl-heptanediamide; TC-H 106|Histone Deacetylase Inhibitor VII Pimelic Diphenylamide 106

Z-AEVD-FMK 500 ug     Z-Ala-Glu-Val-Asp-Fluoromethyl Ketone; methyl-14S-2-fluoroacetyl-11S-isopropyl-8S-3-methoxy-3-oxopropyl-5S-methyl-3,6,9,12-tetraoxo-1-phenyl-2-oxa-4,7,10,13-tetraazahexadecan-16-oate

JWH 203 N-4-hydroxypentyl metabolite-d5 500 ug     2-2-chlorophenyl-1-1-4-hydroxypentyl-1H-indol-3-ylethan-1-one-24,5,6,7-d5; JWH 203 N-4-hydroxypentyl metabolite-d5

17-phenyl trinor Prostaglandin F2α ethyl amide (1 mg)     .,15S-trihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-amide 17-phenyl trinor PGF2α ethyl amide|15(S)-Bimatoprost|Bimatoprost; 17-phenyl trinor Prostaglandin F2α ethyl amide
Goat Anti-Mouse IgG 500 dtn     Goat Anti-Mouse IgG

Azumolene wo7ium salt 5 mg     EU4093; 1-[[[5-4-bromopxenyl-2-oxazolyl]metxylene]amino]-2,4-imidazolidinedione, monowo7ium salt

FITC-C6-LEHD-FMK     FITC-C6-LEHD-FMK

Rasagiline 25 mg     1R-2,3-dixy7no-N-2-propyn-1-yl-1H-inden-1-amine Azilect ; Rasagiline

11Z),14Z-Eicosadienoic Acid 500 mg     11Z,14Z-eicosadienoic acid; 11Z),14Z-Eicosadienoic Acid

5-     +-Abscisic acid
hemin

四號(hào)瓊脂基礎(chǔ) No.4 Agar Base 用于霍亂弧菌的選擇性分離,后加亞碲酸鉀

全胃蛋白胨 全胃蛋白胨 250 BR

高氏合成一號(hào)瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于的培養(yǎng)incubationmedia高氏合成一號(hào)瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于的培養(yǎng)

HondaToxin-ProducingBroth
真菌培養(yǎng)基250g用于藥品,生物制品霉菌無(wú)菌試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

半固體布氏肉湯(0.18%瓊脂) 250(g) incubation media 半固體布氏肉湯(0.18%瓊脂) 250(g)

BS瓊脂 Bismuth Sulfite Agar 250 用于食品中沙門氏菌的檢驗(yàn)

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Iodinesolution
10nt 隨機(jī)引物,0.5μg/μL5μg圖片Hottinger'sAgar

Agar LEVINE-EMB eosine-methylene blue-lactose agar acc.to LEVINE, 1.01342.0500 MERCK默克 incubation media Agar LEVINE-EMB eosine-methylene blue-lactose agar acc.to LEVINE, 1.01342.0500 MERCK默克

多粘菌素B肉湯基礎(chǔ) 250g 用于副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)(SN0173-92)

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