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更新時間:2017-07-17 13:46:21瀏覽次數(shù):115次
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Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg保存產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg保存詳細說明書:
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg保存使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
17-trans Prostaglandin E3 (100 ug) 9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E,17E-trien-1-oic acid; 17-trans PGE3; 17-trans Prostaglandin E3
ERK Inhibitor (5 mg) Extracellular Regulated Kinase Inhibitor; 3-(2-aminoethyl)-5-[(4-ethoxyphenyl)methylene]-2,4-thiazolidinedione, monohydrochloride
維生素B1(鹽酸噻胺)(25GM) Thiamine HCl, 67-03-8; ≥99%
Calpain Inhibitor I (5 mg) N-acetyl-L-leucyl-N-[(1S)-1-formylpentyl]-L-leucinamide; Ac-Leu-Leu-Nle-Aldehyde|ALLN|MG 101; Calpain Inhibitor I
8-hydroxy Guanine (hydrochloride) (10 mg) 2-amiH-purine-6,8-dione, monohydrochloride; 8-Oxoguanine|NSC 22728-hydroxy Guanine (hydrochloride)
Universal Protease and Phosphatase Inhibitor Cocktail , EDTA-Free, EZBlock EZBlock Universal Protease and Phosphatase Inhibitor Cocktail , EDTA-Free
Methyltransferase Assay Buffer (1 ea) MT Assay Buffer; Methyltransferase Assay Buffer
磷酸化組蛋白H3S10多肽 Phospho Histone Ser10 Peptide (200 ul)
Pimelic Diphenylamide 106 (1 mg) N1-(2-aminophenyl)-N7-(4-methylphenyl)-heptanediamide; TC-H 106|Histone Deacetylase Inhibitor VII; Pimelic Diphenylamide 106
Z-AEVD-FMK (1 mg) Z-Ala-Glu-Val-Asp-Fluoromethyl Ketone; methyl-14S-(2-fluoroacetyl)-11S-isopropyl-8S-(3-methoxy-3-oxopropyl)-5S-methyl-3,6,9,12-tetraoxo-1-phenyl-2-oxa-4,7,10,13-tetraazahexadecan-16-oate
JWH 203 N-(4-hydroxypentyl) metabolite-d5 (1 mg) 2-(2-chlorophenyl)-1-(1-(4-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl)ethan-1-one-2,4,5,6,7-d5; JWH 203 N-(4-hydroxypentyl) metabolite-d5
Vitamin D2 (10 g) trimethyl-2-hexen-1-yl]-4H-inden-4-ylidene]ethylidene]-cyclohexanol; Ergocalciferol|Calciferol|Fortodyl|Infron|Mulsiferol|NSC 62792|Radiostol|Uvesterol D; Vitamin D2
Mouse Monoclonal Anti-Rabbit IgG (500 dtn) Mouse Monoclonal Anti-Rabbit IgG
Azumolene (wo7ium salt) (1 mg) EU4093; 1-[[[5-(4-bromopxenyl)-2-oxazolyl]metxylene]amino]-2,4-imidazolidinedione, monowo7ium salt
Benzoyl-Leu-Gly-Arg-Aminoluciferin Benzoyl-Leu-Gly-Arg-Aminoluciferin
Rasagiline (10 mg) (1R)-2,3-dixy7no-N-2-propyn-1-yl-1H-inden-1-amine; Azilect ; Rasagiline
11(Z),14(Z)-Eicosadienoic Acid (250 mg) 11Z,14Z-eicosadienoic acid; 11(Z),14(Z)-Eicosadienoic Acid
2E- trans-Zeatin
酵母浸出物葡萄糖*瓊脂培養(yǎng)基250g用于乳和乳制品中酵母菌和霉菌的計數(shù)
水瓊脂培養(yǎng)基 250(g) incubation media 水瓊脂培養(yǎng)基 250(g)
乳糖發(fā)酵管 乳糖發(fā)酵管 20支 BR
*發(fā)酵培養(yǎng)基250生化試驗培養(yǎng)基,用于細菌(如*)*發(fā)酵試驗(GB標準)incubationmedia*發(fā)酵培養(yǎng)基250生化試驗培養(yǎng)基,用于細菌(如*)*發(fā)酵試驗(GB標準)
Campy-CefexSupplement
亞鹽-多粘菌素-*瓊脂基礎(SPS)2803g用于食品和礦泉水中產氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)和計數(shù)(GB/T8538-2008,GB/T4789.28-2003中4.69,GB/...
Super Broth Top Agar 培養(yǎng)基 250g incubation media Super Broth Top Agar 培養(yǎng)基 250g
熒光假單胞菌 支/瓶
*溶液支每支加入HB0中(GB標準)
BloodAgarBaseN0.2
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg保存STAA培養(yǎng)基250g用于熱死環(huán)絲菌的分離培養(yǎng)。
Agar test PH6.0 for the inhibitor test測試瓊脂PH6.0(抑制劑測試) 1.10663.0500 MERCK默克 incubation media Agar test PH6.0 for the inhibitor test測試瓊脂PH6.0(抑制劑測試) 1.10663.0500 MERCK默克
蛋白胨水(靛基質培養(yǎng)基) 100g 供鑒別細菌能否產生靛基質的生化反應
VioletRedBileAgar
綠膿菌素測定培
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