cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次圖片使用方法：
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例，如果反應(yīng)體系不是 30 uL，各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中，加入下列成分：易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板（10ng/uL） 1 uL PCR 引物(自備，10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶（5U/uL） 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR（循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表），然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件，一般可以先嘗試下面的 PCR 條件： PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次（見(jiàn)注） 72℃ 1 分鐘注：易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng)，也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次圖片產(chǎn)品及特點(diǎn)：
易錯(cuò) PCR（error-prone PCR）是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性，在一定條件下（如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在）能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法，則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下：本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā)，本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1. 即開(kāi)即用，十分簡(jiǎn)單方便，尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，突變率穩(wěn)定，突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% （±0.13%），詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單，但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn)，則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體，也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR（sequential error-prone PCR），只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可，使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物，對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物，建議分段擴(kuò)增。
cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次圖片DNA 擴(kuò)增效率下降；
溫度低產(chǎn)量高，但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配，非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度，可根據(jù)引物的（G+C）%含量進(jìn)行推測(cè)，一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃，退火時(shí)間一般為 30~60 秒，足以使引物與模板之間*結(jié) 合，長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次圖片詳細(xì)說(shuō)明書(shū)：

Prostaglandin E3 （1 mg）     9-oxo-11。alpha。，15S-dihydroxy-prosta-5Z，13E，17Z-trien-1-oic acid； PGE3； Prostaglandin E3

MK2 Inhibitor III （500 ug）     1,5,6,7-tetrahydro-2-[2-（3-inoneolinyl）-4-pyridinyl]-4H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one, monohydrate

蔗糖（5KG）     Sucrose， 57-50-1

Calpain Inhibitor I （10 mg）     N-acetyl-L-leucyl-N-[（1S）-1-formylpentyl]-L-leucinamide； Ac-Leu-Leu-Nle-Aldehyde|ALLN|MG 101； Calpain Inhibitor I

Pimonidazole （5 mg）     α-[（2-nitH-imidazol-1-yl）methyl]-1-pipeni7ineethanol； NSC 380540|Ro 03-8799； Pimonidazole

Universal Protease and Phosphatase Inhibitor Cocktail， EZBlock     EZBlock Universal Protease and Phosphatase Inhibitor Cocktail
LSD1 Assay Peptide （1 ea）     LSD1 Peptide|Lysine-Specific Demethylase 1 Assay Peptide； LSD1 Assay Peptide

*基化組蛋白H4K20多肽     Trimethyl Histone H4K20 Peptide （200 ul）

N-octadecanoyl-L-Homoserine lactone （5 mg）     N-[（3S）-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-octadec*； C18-HSL； N-octadecanoyl-L-Homoserine lactone

Ac-DEVD-AMC （10 mg）     Caspase-3 Substrate （Fluorogenic）|N-Acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-7-amido-4-Methylcoumarin； N-acetyl-L-α-aspartyl-L-α-glutamyl-L-valyl-N-（4-methyl-2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl）-L-α-asparagine

MAM2201 N-pentanoic acid metabolite-d5 （100 ug）     5-（3-（4-methyl-1-naphthoyl）-1H-indol-1-yl-2，4，5，6，7-d5）pentanoic acid； JWH 122 N-pentanoic acid metabolite-d5； MAM2201 N-pentanoic acid metabolite-d5

Ionomycin (Calcium salt)     Ionomycin (Calcium salt)
UltraPure Water （4 L）     UltraPure Water

3-[2-N-（Biotinyl）aminoetxyldithio]propanoic Acid （25 mg）     3-[[2-[[5-[（3aS,4S,6aR）-hexaxy7no-2-oxo-1H-thieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-1-oxopentyl]amino]etxyl]dithio]-propanoic acid

FMOC-Lys（Cy3）-OH     FMOC-Lys（Cy3）-OH

Amiodarone （xy7nochloride） （1 g）     （2-butyl-3-benzofuranyl）[4-[2-（dietxylamino）ethoxy]-3，5-diiodopxenyl]-metxanone， monoxy7nochloride； Cordarex|Pacerone ； Amiodarone （xy7nochloride）

Stearidonic Acid （5 mg）     6Z，9Z，12Z，15Z-octadecatetraenoic acid； Moroctic Acid； Stearidonic Acid

2-xy7noxy-4-[[[[4-metxylpxenyl）sulfonyl]oxy]acetyl]amino]-benzoic acid； NSC 74859； S3I-201     EZSolution Stat3 Inhibitor I， S3I-201
D/ENeutralizingBroth

水稻水培養(yǎng)液 250g 用于水稻的水培養(yǎng)液

改良綠色酵母菌和真菌肉湯 m-GREEN YEAST and FUNGI BROTH 250 用于飲料中真菌及酵母菌檢測(cè)(Acumedia方法)

標(biāo)準(zhǔn)Ⅰ號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊?cè)鉁?/span>250g/瓶用于細(xì)菌培養(yǎng)，營(yíng)養(yǎng)豐富incubationmedia標(biāo)準(zhǔn)Ⅰ號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊?cè)鉁?/span>250g/瓶用于細(xì)菌培養(yǎng)，營(yíng)養(yǎng)豐富

ChocolateAgar
LysozymeBrothBase

葡萄糖瓊脂 Dextrose Agar 用于細(xì)菌的綜合生化試驗(yàn)

XLD 瓊脂 Xylose Lysine Desoxycholate Agar 250 選擇性培養(yǎng)基，用于志賀氏菌的選擇性培養(yǎng)(FDA標(biāo)準(zhǔn))

脫脂奶蔗糖蛋白胨培養(yǎng)基250g/瓶用于致病性嗜水氣單胞菌的鑒別incubationmedia脫脂奶蔗糖蛋白胨培養(yǎng)基250g/瓶用于致病性嗜水氣單胞菌的鑒別

ModifiedSorbitolMaconkeyAgar
cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次圖片蠟樣芽孢桿菌顯色培養(yǎng)基CRM005l用于食品樣本中蠟樣芽孢桿菌的快速分離和鑒定。

Agar 瓊脂粉 Japan 1kg incubation media Agar 瓊脂粉 Japan 1kg

裂皮側(cè)耳 產(chǎn)丁酸 支/瓶

TTBBroth

TryptoseSoyaAgar

cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次圖片變性溫度與時(shí)間：
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度，達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板，PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*， DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性，因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高，又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒，高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短，以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力， 高變性溫度不宜超過(guò) 95℃。 退火溫度與時(shí)間：退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng)，但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合