miRNA cDNA *鏈合成試劑盒25 次保存詳細說明書：

miRNA cDNA *鏈合成試劑盒25 次保存產(chǎn)品及特點：
易錯 PCR（error-prone PCR）是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性，在一定條件下（如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在）能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法，則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下：本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā)，本產(chǎn)品具有下列特點：
1. 即開即用，十分簡單方便，尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化，突變率穩(wěn)定，突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% （±0.13%），詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單，但如果在 PCR 引物中設計位點，則可使產(chǎn)物克隆到表達載體，也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR（sequential error-prone PCR），只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可，使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物，對于 1kb 以上的產(chǎn)物，建議分段擴增。
miRNA cDNA *鏈合成試劑盒25 次保存變性溫度與時間：
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度，達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板，PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*， DNA 雙鏈會很快復性，因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高，又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒，高溫時間應盡量縮短，以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力， 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間：退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強，但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
miRNA cDNA *鏈合成試劑盒25 次保存DNA 擴增效率下降；
溫度低產(chǎn)量高，但過低可造成引物與模板 錯配，非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度，可根據(jù)引物的（G+C）%含量進行推測，一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃，退火時間一般為 30~60 秒，足以使引物與模板之間*結(jié) 合，長時間退火沒有必要。
miRNA cDNA *鏈合成試劑盒25 次保存使用方法：
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例，如果反應體系不是 30 uL，各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中，加入下列成分：易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板（10ng/uL） 1 uL PCR 引物(自備，10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶（5U/uL） 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR（循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表），然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件，一般可以先嘗試下面的 PCR 條件： PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次（見注） 72℃ 1 分鐘注：易錯 PCR 一般不需要熱啟動，也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
Prostaglandin E3 （100 ug）     9-oxo-11。alpha。，15S-dihydroxy-prosta-5Z，13E，17Z-trien-1-oic acid； PGE3； Prostaglandin E3

MK2 Inhibitor III （1 mg）     1,5,6,7-tetrahydro-2-[2-（3-inoneolinyl）-4-pyridinyl]-4H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one, monohydrate

蔗糖（25KG）     Sucrose， 57-50-1

XTT （sodium salt） （50 mg）     2，3-bis（2-methoxy-4-nitno-5-sulfophenyl）-5-[（phenylamino）carbonyl]-inner salt-2H-tetrazolium， monosodium salt； XTT （sodium salt）

Pimonidazole （10 mg）     α-[（2-nitH-imidazol-1-yl）methyl]-1-pipeni7ineethanol； NSC 380540|Ro 03-8799； Pimonidazole

Phosphatase Inhibitor Cocktail IV， EZBlock     EZBlock Phosphatase Inhibitor Cocktail IV
LSD1 Assay Fluorometric Substrate （1 ea）     Fluorometric Substrate|Lysine-Specific Demethylase 1 Assay Fluorometric Substrate； LSD1 Assay Fluorometric Substrate

*標記單甲基化組蛋白H4K20多肽     Biotinylated Monomethyl Histone H4K20 Peptide （100 ul）

N-octadecanoyl-L-Homoserine lactone （10 mg）     N-[（3S）-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-octadec*； C18-HSL； N-octadecanoyl-L-Homoserine lactone

MTEP （hydrochloride） （5 mg）     3-[2-（2-methyl-4-thiazolyl）ethynyl]-pyridine, monohydrochloride

RCS-4 N-pentanoic acid metabolite-d5 （500 ug）     5-（3-（4-methoxybenzoyl）-1H-indol-1-yl-2，4，5，6，7-d5）-pentanoic acid； RCS-4 N-pentanoic acid metabolite-d5

Geldanamycin     Geldanamycin
13（S）-HOTrE （5 mg）     13S-xy7noxy-9Z，11E，15Z-octadecatrienoic acid； 13（S）-HOTrE

3-[2-N-（Biotinyl）aminoetxyldithio]propanoic Acid （10 mg）     3-[[2-[[5-[（3aS,4S,6aR）-hexaxy7no-2-oxo-1H-thieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-1-oxopentyl]amino]etxyl]dithio]-propanoic acid

RPE-iFluor 647 串聯(lián)化合物     RPE-iFluor 647 Tandem

Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide （100 mg）     N-（2-xy7noxyetxyl）-8Z，11Z，14Z-eicosatrienamide； Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide

Stearidonic Acid （1 mg）     6Z，9Z，12Z，15Z-octadecatetraenoic acid； Moroctic Acid； Stearidonic Acid

2-Chloro-N-（4-chloro-3-（pyridine-2-yl）pxenyl）-4-（metxylsulfonyl）benzamide； HhAntag691     EZSolution GDC-0449
快速硫化氫試驗瓊脂250g用于彎曲桿菌的硫化氫試驗(GB標準)

水稻赤霉菌培養(yǎng)基 250g 用于水稻中赤霉菌培養(yǎng)

胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE) Trypticase Soy-Yeast Extract Agar 250 用于單增李氏菌的分純，培養(yǎng)，可用于做7%羊血瓊脂(SN標準)

7.5%肉湯250g/瓶用于*的均質(zhì)增菌incubationmedia7.5%肉湯250g/瓶用于*的均質(zhì)增菌

MEMmaintenanceoffluid
PNB(對硝基苯)加入改良羅氏培養(yǎng)基中制成PNB培養(yǎng)基,用于分枝桿菌菌型鑒定

羅斯-孟加拉*瓊脂 incubation media 羅斯-孟加拉*瓊脂

馬鈴薯葡萄糖瓊脂(椰毒假單胞) 250g 用于椰毒假單胞菌酵米面亞種的計數(shù)和分離

兔脂肪間質(zhì)干細胞成脂誘導分化培養(yǎng)基Rabbitadiposederivedmesenchymalstemcellsintotheculturemediuminduceddifferentiationoffat

萘啶酮酸 10mg/支*5 每支添加于225mlHB415
miRNA cDNA *鏈合成試劑盒25 次保存營養(yǎng)瓊脂250g細菌總數(shù)測定，細菌傳代培養(yǎng)

AgarLactose TTC with Tergitol( base) 乳糖TTC瓊脂 1.07680.0500 MERCK默克 incubation media AgarLactose TTC with Tergitol( base) 乳糖TTC瓊脂 1.07680.0500 MERCK默克

7.5%肉湯 250g 用于*和其它耐鹽菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB 4789.10-2010和GB7918.5-87)。

狗脂肪間質(zhì)干細胞成軟骨誘導分化