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cDNA *鏈合成試劑盒50 次圖片

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更新時(shí)間:2017-07-17 13:39:09瀏覽次數(shù):140次

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cDNA *鏈合成試劑盒50 次圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

cDNA *鏈合成試劑盒50 次圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
cDNA *鏈合成試劑盒50 次圖片變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
cDNA *鏈合成試劑盒50 次圖片DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
cDNA *鏈合成試劑盒50 次圖片詳細(xì)說(shuō)明書:

cDNA *鏈合成試劑盒50 次圖片使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
20-hydroxy Prostaglandin E2 500 ug     9-oxo-11α,15S,20-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 20-hydroxy PGE2 20-hydroxy Prostaglandin E2

AdipoRon 10 mg     2-4-benzoylphenoxy-N-[1-phenylmethyl-4-piperidinyl]-acetamide

蔗糖(1KG     Sucrose, 57-50-1

XTT sodium salt 25 mg     23-bis2-methoxy-4-nitno-5-sulfophenyl-5-[phenylaminocarbonyl]-inner salt-2H-tetrazolium, monosodium salt XTT sodium salt

n-Triacontanol 50 mg     1-triacontanol; Miraculan|Well-Bloom; n-Triacontanol

Caspase家族抑制劑套裝     Caspase Family Inhibitor Set
LSD1 Assay Buffer 10X 1 ea     Assay Buffer 10X|Lysine-Specific Demethylase 1 Assay Buffer 10X); LSD1 Assay Buffer 10X

乙?;M蛋白H4K5多肽     Acetyl Histone H4K5 Peptide 100 ul

Mirin 5 mg     2-amino-5-[4-hydroxyphenylmethylene]-45H-thiazolone; Mirin

Glutathione ethyl ester 50 mg     GSH ethyl ester L-γ-glutamyl-L-cysteinyl-glycine 3-ethyl ester

RCS-4 N-pentanoic acid metabolite-d5 1 mg     5-3-4-methoxybenzoyl-1H-indol-1-yl-2,4,56,7-d5-pentanoic acid; RCS-4 N-pentanoic acid metabolite-d5

Calyculin A     Calyculin A
13S-HOTrE 500 ug     13S-xy7noxy-9Z,11E15Z-octadecatrienoic acid; 13S-HOTrE

Biotin-HPDP 5 mg     3aS,4S,6aR-hexaxy7no-2-oxo-N-[6-[[1-oxo-3-2-pyridinyldithiopropyl]amino]hexyl]-1H-thieno[3,4-d]imidazole-4-pent*

APC-iFluor 700 串聯(lián)化合物     APC-iFluor 700 Tandem

Docosapentaenoic Acid 25 mg     7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosapentaenoic acid; Docosapentaenoic Acid

45-EpDPE metxyl ester 50 ug     4,5-epoxy-7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosapentaenoic acid metxyl ester; 45-epoxy Docosapentaenoic Acid metxyl ester|4,5-EDP metxyl ester; 45-EpDPE metxyl ester

N-R-2-xy7noxyaminocarbonylmetxyl-4-metxylpentanoyl-L-naphthylalanyl-L-alanine amide TNF protease inhibitor-0; C1     EZSolution TAPI-1
雙抗巧克力瓊脂250g用于嗜血桿菌和奈瑟菌的培養(yǎng)

雙糖鐵瓊脂 incubation media 雙糖鐵瓊脂

甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂 100g 用于*的耐熱核酸酶的試驗(yàn)。(SN 0172-92)。

Wistar大鼠脂肪間質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化*培養(yǎng)基Wistarratadiposemesenchymalstemcellsintochondrocytesinduceddifferentiationofcompletemedium

酸性肉湯 250g 用于酸性缺罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢驗(yàn)
假單胞分離瓊脂250g用于假單胞菌群的測(cè)定

KING agar B base(Dank Standard)KIND 瓊脂B基礎(chǔ) 1.10991.0500 MERCK默克 incubation media KING agar B base(Dank Standard)KIND 瓊脂B基礎(chǔ) 1.10991.0500 MERCK默克

Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ) 250g 用于凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)(GB 4789.10-2010,SN0172-92和化妝品衛(wèi)生規(guī)范微...

兔脂肪間質(zhì)干細(xì)
cDNA *鏈合成試劑盒50 次圖片NaClNutrientAgar

AHMMedium

MCP瓊脂 MCP Agar 250 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)(Acumedia 方法)

BPLS瓊脂250g/瓶用于樣本中沙門氏菌的選擇性分離incubationmediaBPLS瓊脂250g/瓶用于樣本中沙門氏菌的選擇性分離

我妻氏*(9cm) 10個(gè)/ 用于神奈川現(xiàn)象試驗(yàn)

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