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更新時(shí)間:2017-07-17 13:37:12瀏覽次數(shù):211次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)高 GC 革氏陽性細(xì)菌 PCR Mix 5100 次圖片
古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存
ROX 參考染料 II100μL保存使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
ROX 參考染料 II100μL保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
ROX 參考染料 II100μL保存DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒有必要。
ROX 參考染料 II100μL保存詳細(xì)說明書:
20-hydroxy Prostaglandin E2 (50 ug) 9-oxo-11α,15S,20-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 20-hydroxy PGE2; 20-hydroxy Prostaglandin E2
Delorazepam (10 mg) Chlordesmethyl7iezepem|NSC 169895|Ro 5-3027; 7-chloro-5-(2-chlorophenyl)-1,3-dihydro-2H-1,4-benzodiazepin-2-one
蔗糖(100GM) Sucrose, 57-50-1
Spermidine (5 g) N1-(3-aminopropyl)-1,4-butanediamine; Spermidine
n-Triacontanol (100 mg) 1-triacontanol; Miraculan|Well-Bloom; n-Triacontanol
3-(Ethyldimethylammonio)propane-1-sulfonate NDSB-256
Resorufin Standard Assay Reagent (1 ea) Resorufin Standard; Resorufin Standard Assay Reagent
乙酰化組蛋白H3K23多肽 Acetyl Histone H3K23 Peptide (100 ul)
Mirin (10 mg) 2-amino-5-[(4-hydroxyphenyl)methylene]-4(5H)-thiazolone; Mirin
Glutathione ethyl ester (100 mg) GSH ethyl ester; L-γ-glutamyl-L-cysteinyl-glycine 3-ethyl ester
RCS-4 N-(5-hydroxypentyl) metabolite-d5 (100 ug) (1-(5-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl-2,4,5,6,7-d5)(4-methoxyphenyl)methanone; RCS-4 N-(5-hydroxypentyl) metabolite-d5
DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 25 kDa DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 25 kDa
13(S)-HOTrE(γ) (1 mg) 13S-xy7noxy-6Z,9Z,11E-octadecatrienoic acid; 13(S)-HOTrE(γ)
Picaridin (50 mg) Bayrepel|Icaridin|KBR 3023|Saltidin
mFluor Red 780 琥珀酰亞胺酯 mFluor Red 780 SE
R-1 metxanandamide (50 mg) N-(2-xy7noxy-1R-metxyletxyl)-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide; (R)-(+)-Arachidonyl-1’-xy7noxy-2’-Propylamide|AM356; R-1 metxanandamide
4(5)-EpDPE metxyl ester (100 ug) 4,5-epoxy-7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosapentaenoic acid, metxyl ester; 4,5-epoxy Docosapentaenoic Acid metxyl ester|4,5-EDP metxyl ester; 4(5)-EpDPE metxyl ester
3,2-Dixy7no-2-(p-xy7noxybenzyl)-6-(p-xy7noxypxenyl)-8-benzylimidazolo[1,2-a]pyrazin-3-one, CLZN Coelenterezine, native
RaKa-Ray培養(yǎng)基250g用于啤酒中乳酸菌檢測(cè)和分離培養(yǎng)
雙歧桿菌BS培養(yǎng)基 Bifidobacterium BS Medium 用于雙歧桿菌分離培養(yǎng)
強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基 RCM 250克 梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
Tinsdale瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于白喉?xiàng)U菌的分離培養(yǎng),每培養(yǎng)基中需添加血清以及250ubationmediaTinsdale瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于白喉?xiàng)U菌的分離培養(yǎng),每培養(yǎng)基中需添加血清以及2501
PSAgar
CCDA添加劑2ml*5支每支添加于200mlCCDA基礎(chǔ)中
胰胨瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于魚類細(xì)菌病中病原菌的分離培養(yǎng)
麥芽浸膏湯 Malt Extract Broth 200 用于酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)
兔血漿纖維蛋白原(RPF)瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于凝固酶陽性葡萄球菌檢測(cè),需添加20805、20806、牛纖維蛋白原、*抑制劑incubationmedia兔血漿纖維蛋白原(RPF)瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于凝固酶陽性葡萄球菌檢測(cè),需添加20805、20806、牛纖維蛋白原、*抑制劑
TSI
ROX 參考染料 II100μL保存DextroseSemisolidMedium
AHM鑒別培養(yǎng)基 250g 用于致病性嗜水氣單胞菌的鑒別
馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA) Potato Dextrose Agar 250 用于霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))
TBX顯色培養(yǎng)基l/瓶用于大腸桿菌快速檢測(cè),24h內(nèi)出結(jié)果,大腸桿菌顯藍(lán)色incubationmediaTBX顯色培養(yǎng)基l/瓶用于大腸桿菌快速檢測(cè),24h內(nèi)出結(jié)果,大腸桿菌顯藍(lán)色
含100mlBolton肉湯均質(zhì)袋 10個(gè)/包 用于空腸彎曲菌的增菌培養(yǎng)
ROX 參考染料 II100μL保存變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合
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