ROX 參考染料200μL運輸-上海莼試生物技術有限公司

ROX 參考染料200μL運輸詳細說明書：

ROX 參考染料200μL運輸產(chǎn)品及特點：
易錯 PCR（error-prone PCR）是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性，在一定條件下（如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在）能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法，則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下：本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā)，本產(chǎn)品具有下列特點：
1. 即開即用，十分簡單方便，尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化，突變率穩(wěn)定，突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% （±0.13%），詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單，但如果在 PCR 引物中設計位點，則可使產(chǎn)物克隆到表達載體，也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR（sequential error-prone PCR），只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可，使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物，對于 1kb 以上的產(chǎn)物，建議分段擴增。
ROX 參考染料200μL運輸變性溫度與時間：
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度，達不到變性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板，PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*， DNA 雙鏈會很快復性，因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高，又會影響酶的活性。一般情況下可設為 94℃ 20~30 秒，高溫時間應盡量縮短，以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力，高變性溫度不宜超過 95℃。退火溫度與時間：退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強，但過高則引物不能與模板牢固結(jié)合.
ROX 參考染料200μL運輸DNA 擴增效率下降；
溫度低產(chǎn)量高，但過低可造成引物與模板錯配，非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的適退火溫度，可根據(jù)引物的（G+C）%含量進行推測，一般實驗中退火溫度比擴增引物的熔解溫度 Tm 低 5℃，退火時間一般為 30~60 秒，足以使引物與模板之間*結(jié) 合，長時間退火沒有必要。
ROX 參考染料200μL運輸使用方法：
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例，如果反應體系不是 30 uL，各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中，加入下列成分：易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板（10ng/uL） 1 uL PCR 引物(自備，10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶（5U/uL） 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR（循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表），然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件，一般可以先嘗試下面的 PCR 條件： PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘循環(huán) 30 次（見注） 72℃ 1 分鐘注：易錯 PCR 一般不需要熱啟動，也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
20-ethyl Prostaglandin E2 （5 mg） 9-oxo-11。alpha。，15S-dihydroxy-20a，20b-dihomoprosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 20-ethyl PGE2； 20-ethyl Prostaglandin E2

Delorazepam （1 mg） Chlordesmethyl7iezepem|NSC 169895|Ro 5-3027； 7-chloro-5-（2-chlorophenyl）-1,3-dihydro-2H-1,4-benzodiazepin-2-one

流*（25GM） Streptomycin Sulfate， ≥650 units/mg

Spermidine （25 g） N1-（3-aminopropyl）-1，4-butanediamine； Spermidine

Traumatic Acid （5 g） 2E-dodecenedioic acid； trans-2-Dodecenedioic Acid； Traumatic Acid

3-（Ethyldimethylammonio）propane-1-sulfonate NDSB-221
COX-FA COX Positive Control （1 ea） COX Positive Control； COX-FA COX Positive Control

*標記乙?；M蛋白H3K14多肽 Biotinylated Acetyl Histone H3K14 Peptide （200 ul）

CAY10594 （5 mg） N-[2-（4-oxo-1-phenyl-1，3，8-triazaspiro[4，5]dec-8-yl）ethyl]-2-nepxtxelenecarboxamide； CAY10594

Desmosterol （5 mg） 24-dehydro Cholesterol|NSC 226126；（3β）-cholesta-5,24-dien-3-ol

RCS-4 N-（5-hydroxypentyl） metabolite-d5 （1 mg）（1-（5-hydroxypentyl）-1H-indol-3-yl-2，4，5，6，7-d5）（4-methoxyphenyl）methanone； RCS-4 N-（5-hydroxypentyl） metabolite-d5

DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 25 kDa DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 25 kDa
13（S）-HOTrE（γ）（500 ug） 13S-xy7noxy-6Z，9Z，11E-octadecatrienoic acid； 13（S）-HOTrE（γ）

Picaridin （5 mg） Bayrepel|Icaridin|KBR 3023|Saltidin

mFluor Red 700 琥珀酰亞胺酯 mFluor Red 700 SE

（±）-2-metxyl Arachidonoyl-2’-Fluoroetxylamide （50 mg）（±）-N-（2-fluoroetxyl）-2-metxyl-5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenamide； 2-metxyl-2’-fluoro AEA|2-metxyl-2’-fluoro Anandamide|O-689；（±）-2-metxyl Arachidonoyl-2’-Fluoroetxylamide

4，5-dexy7no Docosahexaenoic Acid （500 ug） 7Z，10Z，13Z，16Z，19Z-docosapentaen-4-ynoic acid； 4，5-dexy7no DHA|4，5-dexy7no Cervonic Acid； 4，5-dexy7no Docosahexaenoic Acid