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即用型高保真 PCR 試劑盒9mL圖片

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更新時間:2017-07-17 13:30:00瀏覽次數(shù):137次

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即用型高保真 PCR 試劑盒9mL圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

即用型高保真 PCR 試劑盒9mL圖片使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
即用型高保真 PCR 試劑盒9mL圖片產(chǎn)品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
即用型高保真 PCR 試劑盒9mL圖片DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測,一般實驗中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
即用型高保真 PCR 試劑盒9mL圖片詳細(xì)說明書:

15R),19R-hydroxy Prostaglandin E2 100 ug     9-oxo-11。alpha。,15R,19R-trihydroxy-prosta-5Z13E-dien-1-oic acid; 15R),19R-hydroxy PGE2; 15R),19R-hydroxy Prostaglandin E2

Volinanserin 10 mg     MDL 100907 αR-2,3-dimethoxyphenyl-1-[2-4-fluorophenylethyl]-4-pipeni7inemethanol

無水*(5GM     Sodium Pyruvate, Sodium Pyruvate

Protocatechuic Acid 100 g     3,4-dihydroxy-benzoic acid; NSC 16631|PCA; Protocatechuic Acid

12-oxo Phytodienoic Acid 100 ug     4-oxo-5α-2Z-pentenyl-2-cyclopentene-1α-octanoic acid; 12-oxo PDA|OPDA; 12-oxo Phytodienoic Acid

3-Ethyldimethylammoniopropane-1-sulfonate     NDSB-201
COX-1 ovine COX-FIS Assay Reagent 1 ea     COX-1 ovine); COX-1 ovine COX-FIS Assay Reagent

*標(biāo)記二甲基化組蛋白H3K79多肽     Biotinylated Dimethyl Histone H3K79 Peptide 200 ul

VU0155069 25 mg     N-[2-[4-5-chloro-2,3-dihydro-2-oxo-1H-benzimidazol-1-yl-1-piperidinyl]-1-methylethyl]-2-nepxtxelenecarboxamide; CAY10593 VU0155069

SANT 1 10 mg     N-

JWH 081 N-pentanoic acid metabolite-d5 1 mg     5-3-4-methoxy-1-naphthoyl-1H-indol-1-yl-2,45,6,7-d5-pentanoic acid; JWH 081 N-pentanoic acid metabolite-d5

DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 6-8 kDa     DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 6-8 kDa
9S-HOTrE 500 ug     9S-xy7noxy-10E12Z,15Z-octadecatrienoic acid 9S-HOTrE

L-Ascorbic Acid 2-phosphate megnewium salt 10 g     AA2P|Ascorbyl PM|Phospitan C; 2-dixy7nogen phosphate-L-ascorbic acid, dimegnewium salt

iFluor 647      iFluor 647 alkyne

Palmitic Acid-d2 250 mg     hexadecanoic-2,2-d2 acid; Palmitic Acid-d2

Docosahexaenoic Acid 50 mg     4Z,7Z10Z,13Z16Z,19Z-docosahexaenoic acid; Cervonic Acid|DHA; Docosahexaenoic Acid

4S,5R-5-[35-bistrifluorometxylpxenyl]-3-{2-[4-fluoro-2-metxoxy-5-propan-2-ylpxenyl]-5-trifluorometxylpxenyl}metxyl-4-metxyl-1,3-oxazolidin-2-one; MK-0859     EZSolution Anacetrapib
PeptoneBacteriological

嗜冷菌計數(shù)瓊脂 Psychrophilic bacteria count agar 用于奶制品中嗜冷微生物的菌落總數(shù)測定

葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基 Dextrose Peptone Medium 250 用于生物制品無菌試驗

葡萄糖肉湯250g/瓶用于糞鏈球菌增菌incubationmedia葡萄糖肉湯250g/瓶用于糞鏈球菌增菌

李氏菌增菌肉湯(LB2) 9ml*20/ 用于李氏菌二步增菌
*5g炭疽桿菌檢測用配套試劑

FRASER Listeria Selective Enrichment Broth( base) 1.10398.0500 MERCK默克 incubation media FRASER Listeria Selective Enrichment Broth( base) 1.10398.0500 MERCK默克

改良EC新生霉素增菌肉湯基礎(chǔ)(mEC+n) 250g 用于致病性大腸桿菌O157:H7的增菌培養(yǎng)(GB/T 4789.36-2008, SN/T 1827-2
即用型高保真 PCR 試劑盒9mL圖片PolyPeptoneYeastExtractMedium

Aliz-gal肉湯(茜素-β-半乳糖苷瓊脂) Aliz-gal Broth 用于食品中大腸菌群快速檢測

PLET 瓊脂基礎(chǔ) PLET Agar Base 250 用于炭疽桿菌的分離鑒別

BIGGY瓊脂250g/瓶用于念珠菌的分離和計數(shù)incubationmediaBIGGY瓊脂250g/瓶用于念珠菌的分離和計數(shù)

胰胨大豆胨固綠瓊脂 250g 用于濾膜細(xì)菌總數(shù)的測定和分離培養(yǎng)(NEOGEN方法)

即用型高保真 PCR 試劑盒9mL圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合

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