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即用型熱啟動(dòng) PCR 試劑盒1.5mL運(yùn)輸

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更新時(shí)間:2017-07-17 13:26:42瀏覽次數(shù):218次

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即用型熱啟動(dòng) PCR 試劑盒1.5mL運(yùn)輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

即用型熱啟動(dòng) PCR 試劑盒1.5mL運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
即用型熱啟動(dòng) PCR 試劑盒1.5mL運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
即用型熱啟動(dòng) PCR 試劑盒1.5mL運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時(shí)間退火沒有必要。
即用型熱啟動(dòng) PCR 試劑盒1.5mL運(yùn)輸詳細(xì)說明書:

即用型熱啟動(dòng) PCR 試劑盒1.5mL運(yùn)輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
tetranor-PGEM 50 ug     9,15-dioxo-11α-hydroxy-1314-dihydro-2,34,5-tetranor-prostan-1,20-dioic acid; tetranor-Prostaglandin E Metabolite; tetranor-PGEM

Prednisolone Phosphate sodium salt 10 g     Disodium Prednisolone 21-Phosphate 11β,17-dihydroxy-21-phosphonooxy-pregna-1,4-diene-3,20-dione, disodium salt

一水*(1KG     Sodium Phosphate, Monobasic, Monohydrate USP Grade; 10049-21-5; Formula:NaH2PO4

NBQX sodium salt 1 mg     1,23,4-tetrahydro-6-nitno-23-dioxo-benzo[f]inoneoxaline-7-sulfonamide, disodium salt NBQX sodium salt

DAF-2 500 ug     2-3,6-dihydroxy-4,5-diamino-9H-xanthen-9-yl-benzoic acid; 45-Diaminofluorescein; DAF-2

Phosphate Buffered Saline Tablets     PBS Tablets
potewwium Phosphate Buffer 500 mM; pH 6。5 5 ml     potewwium Phosphate Buffer 500 mM pH 6。5

SRT 1720 10 mg     CAY10559|SIRT 1933 N-[2-[3-1-piperazinylmethylimidazo[2,1-b]thiazol-6-yl]phenyl]-2-quinoxalinecarboxamide

Daidzin 50 mg     7-(β-D-glucopyranosyloxy-3-4-hydroxyphenyl-4H-1-benzopyran-4-one; Daidzoside| NPI 031D; Daidzin

Neutrophil Elastase Inhibitor 25 mg     1-3-methylbenzoyl-1H-indazole-3-carbonitnile

AM694 N-pentanoic acid metabolite 10 mg     5-3-2-iodobenzoyl-1H-indol-1-ylpentanoic acid AM694 N-pentanoic acid metabolite

DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 3.5 kDa     DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 3.5 kDa
Arachidonoyl Ethanolamide-d8 500 ug     N-2-xy7noxyetxyl-5Z,8Z11Z,14Z-eicosatetraenamide-5,6,8,911,12,1415-d8; AEA-d8|Anandamide-d8; Arachidonoyl Ethanolamide-d8

TNP-470 5 mg     AGM-1470|NSC 642492|O-Chloroacetyl-carbamoyl Fumagillol 3R,4S,5S,6R-5-metxoxy-4-[2R,3R-2-metxyl-3-3-metxyl-2-buten-1-yl-2-oxiranyl]-1-oxaspiro[2.5]oct-6-yl ester N-2-chloroacetyl-carbamic acid

iFluor 350 酰進(jìn)     iFluor 350 hydrazide

2-Ami-pxenylbutane xy7nochloride 10 mg     α-etxyl-benzeneethanamine, monoxy7nochloride AEPEA|Butanpxenamine|α-etxylpxenetxylamine; 2-Ami-pxenylbutane xy7nochloride

MEDICA 16 50 mg     3,3,14,14-tetrametxylhexadecanedioic acid MEDICA 16

1aR,     Ingenol
*瓊脂培養(yǎng)基250g用于紡織品微真菌影響評價(jià)試驗(yàn)

山羊血清 采集自供體動(dòng)物 新西蘭 16210-064 100ml incubation media 山羊血清 采集自供體動(dòng)物 新西蘭 16210-064 100ml

卷枝毛霉 產(chǎn)* /

Cary-Blair氏*管20/包用于運(yùn)送腸道致病菌標(biāo)本

TetrathionateBrothBase
TetrathionateBrothBase

RS瓊脂 250(g) incubation media RS瓊脂 250(g)

破傷風(fēng)梭菌培養(yǎng)基基礎(chǔ) Clostridium Tetani Medium 250 供破傷風(fēng)梭菌產(chǎn)毒用

*瓊脂基礎(chǔ)250用于炭疽桿菌的莢膜培養(yǎng)incubationmedia*瓊脂基礎(chǔ)250用于炭疽桿菌的莢膜培養(yǎng)

Offfibersheepblood
即用型熱啟動(dòng) PCR 試劑盒1.5mL運(yùn)輸Brothmedium

Antibiotic agar No.2 GROVE and RANDALL medium No.2 抗生素瓊脂2 1.05270.0500 MERCK默克 incubation media Antibiotic agar No.2 GROVE and RANDALL medium No.2 抗生素瓊脂2 1.05270.0500 MERCK默克

PALCAM瓊脂基礎(chǔ) 250g 用于單增李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB 4789.30-2010SN/T0184-2005)

 

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