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即用型 PCR 試劑盒 3.09 mL圖片

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更新時(shí)間:2017-07-17 13:26:19瀏覽次數(shù):89次

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即用型 PCR 試劑盒 3.09 mL圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

即用型 PCR 試劑盒 3.09 mL圖片詳細(xì)說(shuō)明書(shū):

即用型 PCR 試劑盒 3.09 mL圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專(zhuān)門(mén)為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
即用型 PCR 試劑盒 3.09 mL圖片變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
即用型 PCR 試劑盒 3.09 mL圖片DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
即用型 PCR 試劑盒 3.09 mL圖片使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
tetranor-PGEM 25 ug     915-dioxo-11α-hydroxy-13,14-dihydro-23,45-tetranor-prostan-1,20-dioic acid; tetranor-Prostaglandin E Metabolite tetranor-PGEM

Prednisolone Phosphate sodium salt 1 g     Disodium Prednisolone 21-Phosphate; 11β,17-dihydroxy-21-phosphonooxy-pregna-1,4-diene-3,20-dione, disodium salt

一水*(100GM     Sodium Phosphate, Monobasic, Monohydrate USP Grade 10049-21-5; Formula:NaH2PO4

Arctigenin 50 mg     3R4R-4-[3,4-dimethoxyphenylmethyl]dihydro-3-[4-hydroxy-3-methoxyphenylmethyl]-23H-furanone; Arctigenin

DAF-2 250 ug     2-3,6-dihydroxy-4,5-diamino-9H-xanthen-9-yl-benzoic acid; 45-Diaminofluorescein; DAF-2

Phosphate Buffered Saline Tablets     PBS Tablets
Fluorometric Thiol Detector 300 ul     Fluorometric Thiol Detector

SRT 1720 1 mg     CAY10559|SIRT 1933 N-[2-[3-1-piperazinylmethylimidazo[2,1-b]thiazol-6-yl]phenyl]-2-quinoxalinecarboxamide

Daidzin 5 mg     7-(β-D-glucopyranosyloxy-3-4-hydroxyphenyl-4H-1-benzopyran-4-one; Daidzoside| NPI 031D Daidzin

Neutrophil Elastase Inhibitor 10 mg     1-3-methylbenzoyl-1H-indazole-3-carbonitnile

AM694 N-pentanoic acid metabolite 1 mg     5-3-2-iodobenzoyl-1H-indol-1-ylpentanoic acid; AM694 N-pentanoic acid metabolite

DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 1 kDa     DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 1 kDa
Arachidonoyl Ethanolamide-d8 1 mg     N-2-xy7noxyetxyl-5Z8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide-56,8,911,12,14,15-d8; AEA-d8|Anandamide-d8; Arachidonoyl Ethanolamide-d8

TNP-470 25 mg     AGM-1470|NSC 642492|O-Chloroacetyl-carbamoyl Fumagillol; 3R,4S,5S,6R-5-metxoxy-4-[2R,3R-2-metxyl-3-3-metxyl-2-buten-1-yl-2-oxiranyl]-1-oxaspiro[2.5]oct-6-yl ester N-2-chloroacetyl-carbamic acid

iFluor 700 馬來(lái)酰亞胺     iFluor 700 maleimide

2-Ami-pxenylbutane xy7nochloride 1 mg     α-etxyl-benzeneethanamine, monoxy7nochloride AEPEA|Butanpxenamine|α-etxylpxenetxylamine; 2-Ami-pxenylbutane xy7nochloride

MEDICA 16 5 mg     33,14,14-tetrametxylhexadecanedioic acid; MEDICA 16

1aR,     Ingenol
ModifiedCamp-BAPAgaradditiveA

*麥康凱瓊脂基礎(chǔ)(SMAC) Sorbitol Maconkey Agar Base 用于大腸桿菌O157的分離培養(yǎng)

乙酰胺瓊脂 Acetamide Agar 250 用于綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))

堿性瓊脂250g/瓶用于霍亂弧菌的選擇性分離incubationmedia堿性瓊脂250g/瓶用于霍亂弧菌的選擇性分離

M肉湯 10ml*20/ 用于干燥食品和種子中沙門(mén)氏菌增菌培養(yǎng)
吖啶黃素5mg*5添加于200mlHBLB2

高滲真菌學(xué)瓊脂 Osmophilic Mycophile Agar 用于高滲食品中酵母菌和霉菌檢測(cè)

葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基 Dextrose Peptone Medium 250 生物制品無(wú)菌試驗(yàn)

*瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于炭疽桿菌的莢膜培養(yǎng),每88ml培養(yǎng)基中添加無(wú)菌氫鈉溶液incubationmedia*瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于炭疽桿菌的莢膜培養(yǎng),每88ml培養(yǎng)基中添加無(wú)菌氫鈉溶液

消毒液中和肉湯 250g 用于中和醇類(lèi)、酚類(lèi)消毒劑、含氯消毒劑
即用型 PCR 試劑盒 3.09 mL圖片瓊脂培養(yǎng)基J250g用于沙門(mén)氏菌選擇性分離培養(yǎng)

Antibiotic agar No.5 GROVE and RANDALL medium No.5抗生素瓊脂5號(hào) 1.05271.0500 MERCK默克 incubation media Antibiotic agar No.5 GROVE and RANDALL medium No.5抗生素瓊脂5號(hào) 1.05271.0500 MERCK默克

牛津瓊脂基礎(chǔ) 100g 用于單核增生李斯特氏菌的選擇性分離(SN0184-2005)。

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