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更新時間:2017-07-17 13:25:54瀏覽次數(shù):140次
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即用型 PCR 試劑盒 3.01 mL價格使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
即用型 PCR 試劑盒 3.01 mL價格產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
即用型 PCR 試劑盒 3.01 mL價格DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
即用型 PCR 試劑盒 3.01 mL價格詳細說明書:
17-phenyl trinor Prostaglandin E2 (5 mg) 9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 17-phenyl trinor PGE2; 17-phenyl trinor Prostaglandin E2
10058-F4 (50 mg) 5-[(4-ethylphenyl)methylene]-2-thioxo-4-thiazolidinone
*七水合物(5KG) Sodium Phosphate, Dibasic, Heptahydrate, ACS Grade; Cas 7782-85-6; Formula: Na2HPO4
Arctigenin (25 mg) (3R,4R)-4-[(3,4-dimethoxyphenyl)methyl]dihydro-3-[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]-2(3H)-furanone; Arctigenin
DAF-2 (100 ug) 2-(3,6-dihydroxy-4,5-diamino-9H-xanthen-9-yl)-benzoic acid; 4,5-Diaminofluorescein; DAF-2
4-Nonylphenyl-polyethylene glycol, Imbentin-N/52, NP 40 NP-40 Substitute, MegaPure Detergent, 10% Solution
Invertase Assay Reagent (1 ea) Invertase Assay Reagent
AZD 2461 4-[[4-fluoro-3-[(4-methoxy-1-piperidinyl)carbonyl]phenyl]methyl]-1(2H)-Phthalazinone
Daidzin (100 mg) 7-(β-D-glucopyranosyloxy)-3-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one; Daidzoside| NPI 031D; Daidzin
25N-NBOMe (hydrochloride) (50 mg) 2;C-N-NBOMe; 2-(2,5-dimethoxy-4-nitnophenyl)-N-(2-methoxybenzyl)ethanamine, monohydrochloride
AM694 N-(5-hydroxypentyl) metabolite (5 mg) [1-(5-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl](2-iodophenyl)-methanone; AM694 N-(5-hydroxypentyl) metabolite
DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 1 kDa DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 1 kDa
Arachidonoyl Ethanolamide-d8 (100 ug) N-(2-xy7noxyetxyl)-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide-5,6,8,9,11,12,14,15-d8; AEA-d8|Anandamide-d8; Arachidonoyl Ethanolamide-d8
TNP-470 (10 mg) AGM-1470|NSC 642492|O-(Chloroacetyl-carbamoyl) Fumagillol; (3R,4S,5S,6R)-5-metxoxy-4-[(2R,3R)-2-metxyl-3-(3-metxyl-2-buten-1-yl)-2-oxiranyl]-1-oxaspiro[2.5]oct-6-yl ester N-(2-chloroacetyl)-carbamic acid
AMCA 疊氮化物 AMCA Azide
2-etxylami-pxenylbutane (xy7nochloride) (50 mg) N,α-dietxyl-benzeneethanamine, monoxy7nochloride; 2-etxylami-pxenylbutane (xy7nochloride)
MEDICA 16 (10 mg) 3,3,14,14-tetrametxylhexadecanedioic acid; MEDICA 16
1,3,4,6,8,13-Hexaxy7noxy-10,11-dimetxylpxenanthro[1,10,9,8-opqra]perylene-7,14-dione Hypericin
YeastPeptoneDextroseAgar
*麥康凱瓊脂基礎(chǔ) 250(g) incubation media *麥康凱瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
緩沖蛋白胨水增菌液 BPW 250克 沙門氏菌前增菌培養(yǎng)和李氏菌前增菌培養(yǎng)
胰胨大豆瓊脂斜面(TSA)250培養(yǎng)副溶血性弧菌,做細胞色素氧化酶實驗(SN標準)incubationmedia胰胨大豆瓊脂斜面(TSA)250培養(yǎng)副溶血性弧菌,做細胞色素氧化酶實驗(SN標準)
0.1%煌綠 1ml*20 每支添加于100mlHB4086中
ColumbiaBloodAgarMedium
糖發(fā)酵肉湯基礎(chǔ) 250(g) incubation media 糖發(fā)酵肉湯基礎(chǔ) 250(g)
溶脲支原體抗體 UU Antibody 1盒 BR
炭疽桿菌診斷抗原疽桿菌檢測用配套試劑incubationmedia炭疽桿菌診斷抗原疽桿菌檢測用配套試劑
Trypticase-Soy-PolymyxinBrothBase
即用型 PCR 試劑盒 3.01 mL價格AgarmediumK(Xylose,lysine,deoxycholateagar)
Antibiotic Brothe 抗生素肉湯 1.05273.0500 MERCK默克 incubation media Antibiotic Brothe 抗生素肉湯 1.05273.0500 MERCK默克
改良的McBride瓊脂MMA 250g 用于單核細胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB/T4789.30-2003,SN0184-93)。
曲霉素瓊脂基礎(chǔ)(AFPA)AFPA用于曲霉菌分離培養(yǎng)
Bifid
即用型 PCR 試劑盒 3.01 mL價格變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合
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