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更新時間:2017-07-17 13:21:16瀏覽次數(shù):98次
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古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存
即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL運(yùn)輸詳細(xì)說明書:
即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL運(yùn)輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL運(yùn)輸使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
17-phenyl trinor Prostaglandin E2 (1 mg) 9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 17-phenyl trinor PGE2; 17-phenyl trinor Prostaglandin E2
10058-F4 (25 mg) 5-[(4-ethylphenyl)methylene]-2-thioxo-4-thiazolidinone
*七水合物(2.5KG) Sodium Phosphate, Dibasic, Heptahydrate, ACS Grade; Cas 7782-85-6; Formula: Na2HPO4
Arctigenin (10 mg) (3R,4R)-4-[(3,4-dimethoxyphenyl)methyl]dihydro-3-[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]-2(3H)-furanone; Arctigenin
2,7-Dichlorodihydrofluorescein diacetate (50 mg) 2-(2,7-dichloro-3,6-diacetyloxy-9H-xanthen-9-yl)-benzoic acid; DCFH|DCFH-DA; 2,7-Dichlorodihydrofluorescein diacetate
4-Nonylphenyl-polyethylene glycol, Imbentin-N/52, NP 40 NP-40 Substitute, MegaPure Detergent, 10% Solution
Sodium Phosphate Assay Buffer (4 ml) Sodium Phosphate Assay Buffer
AZD 2461 4-[[4-fluoro-3-[(4-methoxy-1-piperidinyl)carbonyl]phenyl]methyl]-1(2H)-Phthalazinone
G-418 Sulfate (1 g) O-2-amino-2,7-dideoxy-D-glycero-α-D-gluco-heptopyranosyl-(1→4)-O-[3-deoxy-4-C-methyl-3-(methylamino)-β-L-arabinopyranosyl-(1→6)]-2-deoxy-sulfate-D-streptamine; Geneticin; G-418 Sulfate
25N-NBOMe (hydrochloride) (10 mg) 2;C-N-NBOMe; 2-(2,5-dimethoxy-4-nitnophenyl)-N-(2-methoxybenzyl)ethanamine, monohydrochloride
AM694 N-(5-hydroxypentyl) metabolite (1 mg) [1-(5-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl](2-iodophenyl)-methanone; AM694 N-(5-hydroxypentyl) metabolite
DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 50 kDa DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 50 kDa
20-HETE-d6 (50 ug) 20-xy7noxy-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-16,16,17,17,18,18-d6 acid; 20-xy7noxy Arachidonic Acid-d6; 20-HETE-d6
CBL-018 (5 mg) naphthalen-1-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate
AMCA etxylenediamine AMCA etxylenediamine
2-etxylami-pxenylbutane (xy7nochloride) (25 mg) N,α-dietxyl-benzeneethanamine, monoxy7nochloride; 2-etxylami-pxenylbutane (xy7nochloride)
17-Octadecynoic Acid (5 mg) 17-octadecynoic acid; Alk-16|17-ODYA; 17-Octadecynoic Acid
N- KN-93
AC肉湯250g用于常見微生物增菌培養(yǎng)和不含防腐劑樣品的無菌試驗
沙氏瓊脂培養(yǎng)基 250(g) incubation media 沙氏瓊脂培養(yǎng)基 250(g)
假單胞F瓊脂 Pseudomonas Agar F 250克 銅綠(綠膿)假單胞菌色素生成試驗
YGC瓊脂250用于奶和奶制品中霉菌及酵母菌分離培養(yǎng)(ISO方法)incubationmediaYGC瓊脂250用于奶和奶制品中霉菌及酵母菌分離培養(yǎng)(ISO方法)
UreaseAgarBase
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基(新藥典)250g用于梭菌的選擇性分離培養(yǎng)
李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MMA) 250(g) incubation media 李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MMA) 250(g)
溶脲支原體培養(yǎng)基 UU Medium 100毫升 BR
炭疽桿菌噬菌體疽桿菌檢測用配套試劑incubationmedia炭疽桿菌噬菌體疽桿菌檢測用配套試劑
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ) 250g 用于蠟樣芽孢桿菌選擇性的增菌培養(yǎng)
即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL運(yùn)輸ironcitrate
APT瓊脂 APT Agar 用于乳酸菌分離培養(yǎng)
PDA瓊脂 Potato Dextrose Agar 250克 霉菌分離培養(yǎng)和霉菌酵母菌計數(shù)
聯(lián)合固氮菌培養(yǎng)基250g/瓶用于固氮螺菌的培養(yǎng)incubationmedia聯(lián)合固氮菌培養(yǎng)基250g/瓶用于固氮螺菌的培養(yǎng)
膽汁液態(tài)培養(yǎng)基 250g 用于糞鏈球菌的膽汁耐受試驗。
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