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即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片

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更新時間:2017-07-17 13:20:53瀏覽次數(shù):140次

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即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片產(chǎn)品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測,一般實驗中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片詳細(xì)說明書:

17-phenyl trinor Prostaglandin E2 500 ug     9-oxo-11alpha。,15S-dihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 17-phenyl trinor PGE2; 17-phenyl trinor Prostaglandin E2

10058-F4 10 mg     5-[4-ethylphenylmethylene]-2-thioxo-4-thiazolidinone

*七水合物(1KG     Sodium Phosphate Dibasic, Heptahydrate, ACS Grade; Cas 7782-85-6 Formula: Na2HPO4

NSC 87877 50 mg     8-hydroxy-7-[2-6-sulfo-2-naphthalenyldiazenyl]-5-inoneolinesulfonic acid; NSC 87877

27-Dichlorodihydrofluorescein diacetate 250 mg     2-2,7-dichloro-36-diacetyloxy-9H-xanthen-9-yl-benzoic acid; DCFH|DCFH-DA; 27-Dichlorodihydrofluorescein diacetate

POE 20 sorbitan monooleate, Polyethylene glycol sorbitan monooleate Polyoxyethylenesorbitan monooleate, Polysorbate 80     Tween 80, MegaPure Detergent, 10% Solution
Sodium Phosphate Assay Buffer 10 ml     Sodium Phosphate Assay Buffer

AZD 2461     4-[[4-fluoro-3-[4-methoxy-1-piperidinylcarbonyl]phenyl]methyl]-12H-Phthalazinone

cis-trismethoxy Resveratrol 500 mg     1,3-dimethoxy-5-[1Z-2-4-methoxyphenylethenyl]-benzene cis-Trimethoxy Stilbene; cis-trismethoxy Resveratrol

25N-NBOMe hydrochloride 1 mg     2;C-N-NBOMe; 2-2,5-dimethoxy-4-nitnophenyl-N-2-methoxybenzylethanamine, monohydrochloride

XLR11 6-hydroxyindole metabolite 5 mg     1-5-fluoropentyl-6-hydroxy-1H-indol-3-yl)(2,2,3,3-tetramethylcyclopropylmethanone; 5-fluoro  6-hydroxyindole metabolite; XLR11 6-hydroxyindole metabolite

DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 50 kDa     DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 50 kDa
20-HETE-d6 25 ug     20-xy7noxy-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-16,1617,17,1818-d6 acid; 20-xy7noxy Arachidonic Acid-d6; 20-HETE-d6

CBL-018 10 mg     naphthalen-1-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate

AMCA C2 馬來酰亞胺     AMCA C2 Maleimide

2-etxylami-pxenylbutane xy7nochloride 10 mg     N,α-dietxyl-benzeneethanamine, monoxy7nochloride; 2-etxylami-pxenylbutane xy7nochloride

17-Octadecynoic Acid 100 mg     17-octadecynoic acid; Alk-16|17-ODYA; 17-Octadecynoic Acid

N-     KN-93
Argininebroth

沙氏葡萄糖肉湯 酵母菌、霉菌以及其它耐酸菌培養(yǎng) 500g incubation media 沙氏葡萄糖肉湯 酵母菌、霉菌以及其它耐酸菌培養(yǎng) 500g

醋酸醋桿菌 食用 /

PH6.8磷酸鹽緩沖液500ml/瓶用于樣品稀釋處理

AntibioticAgarNo.6
PseudomonasAgarP

胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE) 250(g) incubation media 胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE) 250(g)

溶脲支原體快速培養(yǎng)基 UU Medium 1人份/1 BR

炭疽桿菌沉淀血清疽桿菌檢測用配套試劑incubationmedia炭疽桿菌沉淀血清疽桿菌檢測用配套試劑

丙酸鹽(枯草芽孢桿菌) 20 用于枯草芽孢桿菌生化試驗
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片UBAMedium

APT肉湯 APT Broth 用于異質(zhì)發(fā)酵乳酸桿菌和其它需高含量鹽酸胺素菌的培養(yǎng)。

OF培養(yǎng)基 HLGB 250 細(xì)菌的氧化發(fā)酵試驗

幽門螺桿菌瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于幽門螺桿菌的分離培養(yǎng),需添加抗生素及馬血incubationmedia幽門螺桿菌瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于幽門螺桿菌的分離培養(yǎng),需添加抗生素及馬血

THB培養(yǎng)基 250g 用于鏈球菌增菌培養(yǎng)

即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合

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