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Taq 酶抗體1000U運(yùn)輸

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更新時(shí)間:2017-07-17 13:19:31瀏覽次數(shù):137次

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Taq 酶抗體1000U運(yùn)輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

Taq 酶抗體1000U運(yùn)輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
Taq 酶抗體1000U運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
Taq 酶抗體1000U運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
Taq 酶抗體1000U運(yùn)輸詳細(xì)說(shuō)明書:

16-phenyl tetranor Prostaglandin E2 1 mg     9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-16-phenyl-17,1819,20-tetranor-prosta-5Z13E-dien-1-oic acid; 16-phenyl tetranor PGE2; 16-phenyl tetranor Prostaglandin E2

Edrophonium chloride 100 mg     Enlon|Tensilon; N-ethyl-3-hydroxy-N,N-dimethyl-benzenaminium, monochloride

無(wú)水*(500GM     Sodium Phosphate, Dibasic, Anhydrous, ACS Grade Cas 7558-79-4; Formula: Na2HPO4; Formula Weight: 141.96

NSC 87877 10 mg     8-hydroxy-7-[2-6-sulfo-2-naphthalenyldiazenyl]-5-inoneolinesulfonic acid; NSC 87877

Dihydrorhodamine 123 25 mg     2-3,6-diamino-9H-xanthen-9-yl-benzoic acid methyl ester; DHR; Dihydrorhodamine 123

Polyethylene glycol sorbitan monolaurate, Polyoxyethylenesorbitan monolaurate     Tween 20 MegaPure Detergent, 10% Solution
DMSO Assay Reagent 1 ml     DMSO Assay Reagent

SureLight R-Phycoerythrin R-PE 1 mg     SureLight R-Phycoerythrin R-PE

cis-trismethoxy Resveratrol 10 mg     13-dimethoxy-5-[1Z-2-4-methoxyphenylethenyl]-benzene; cis-Trimethoxy Stilbene; cis-trismethoxy Resveratrol

25I-NBOH hydrochloride 1 mg     2C-I-NBOH; 2-(((4-iodo-2,5-dimethoxyphenethylaminomethylphenol, monohydrochloride

JWH 081 N-pentanoic acid metabolite 5 mg     5-3-4-methoxy-1-naphthoyl-1H-indol-1-ylpentanoic acid; JWH 081 N-pentanoic acid metabolite

DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 25 kDa     DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 25 kDa
Arachidonic Acid metxyl ester-d8 10 mg     5Z,8Z11Z,14Z-eicosatetraenoic-5,6,8,9,11,12,14,15-d8 acid, metxyl ester; metxyl Arachidonate-d8; Arachidonic Acid metxyl ester-d8

GSK-LSD1 xy7nochloride 25 mg     N-[1R,2S-2-pxenylcyclopropyl]-4-piperidinamine, dixy7nochloride

5-FAM-X 琥珀酰亞胺酯     5-FAM-X, SE

5-chloro AB-PINACA 1 mg     N-1-amino-3-metxyl-1-oxobutan-2-yl-1-5-chloropentyl-1H-indazole-3-carboxamide 5-chloro AB-PINACA

N-Oleoyl Glycine 500 mg     N-9Z-octadecenoyl-glycine; N-Oleoyl Glycine

E-N-[4-xy7noxy-3-metxoxypxenylmetxyl]-8-metxyl-6-nonenamide     Capsaicin
Brain-extractedagarBaptistHeart

沙氏葡萄糖*瓊脂 Sabourauds Glucose chloramphenicol Agar 用于化妝品中白色念球菌分離培養(yǎng)

西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂 Simmons Citrate Agar 250 用于腸道菌的檸檬鹽利用試驗(yàn)

VRBG瓊脂250用于奶粉中坂崎桿菌的分離培養(yǎng)(FDA方法)incubationmediaVRBG瓊脂250用于奶粉中坂崎桿菌的分離培養(yǎng)(FDA方法)

DulcitolSemisolidAgar
哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)250g營(yíng)養(yǎng)非常豐富,用于各種細(xì)菌的基礎(chǔ)培養(yǎng)基

CZAPEK-DOX agar 查貝克-多克斯瓊脂 1.05460.0500 MERCK默克 incubation media CZAPEK-DOX agar 查貝克-多克斯瓊脂 1.05460.0500 MERCK默克

*(改良月桂基鹽胰蛋白胨肉湯凍干配套試劑) 10/ 每支添加于100ml(022212)中配成MLST

胎兒骨髓間質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基Fetalbonemarrowmesenchymalstemcellsi
Taq 酶抗體1000U運(yùn)輸DesoxycholateCitrateAgar

Argininebroth

菌種保存培養(yǎng)基 Strain Store Medium 250 用于常用細(xì)菌斜面?zhèn)鞔笆覝乇4?/span>

念珠菌顯色培養(yǎng)基l/瓶用于念珠菌快速檢測(cè),48~72h內(nèi)出結(jié)果,白色念珠菌顯綠色,克柔氏念珠菌顯粉紫色incubationmedia念珠菌顯色培養(yǎng)基l/瓶用于念珠菌快速檢測(cè),48~72h內(nèi)出結(jié)果,白色念珠菌顯綠色,克柔氏念珠菌顯粉紫色

0.1%蛋白胨水 500ml/ 用于樣品的制備和稀釋

Taq 酶抗體1000U運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合

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