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石蠟油,PCR 級10mL圖片

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更新時間:2017-07-17 13:03:02瀏覽次數(shù):175次

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石蠟油,PCR 級10mL圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

石蠟油,PCR 10mL圖片詳細說明書:

石蠟油,PCR 10mL圖片產(chǎn)品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
石蠟油,PCR 10mL圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
石蠟油,PCR 10mL圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
石蠟油,PCR 10mL圖片使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin E2 50 mg     9,15-dioxo-11。alpha。-hydroxy-prost-5Z-en-1-oic acid; 1314-dihydro-15-keto PGE2; 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin E2

Desmethylene Paroxetine hydrochloride 50 mg     4-[[3S,4R-4-4-fluorophenyl-3-piperidinyl]methoxy]-1,2-benzenediol, monohydrochloride

無水流鉀(100GM     potewwium Sulfate Anhydrous,   777-80-5; Formula: K2SO4; FW: 174.26

4Z),7Z),10Z),13Z-Hexadecatetraenoic Acid-d5 50 ug     4Z7Z,10Z,13Z-hexadeca-47,1013-tetraenoic-15,15’,16,1616-d5 acid; 4Z),7Z),10Z),13Z-Hexadecatetraenoic Acid-d5

AAPH 10 g     2,2-azobis-2-methyl-propanimidamide dihydrochloride AAPH

7-((4-((3-ethynylphenylamino-7-methoxyinoneazolin-6-yloxy-N-hydroxyhept*     CUDC-101
PtdIns-4,5-P2 1,2-dioctanoyl sodium salt 100 ug     1-1,2R-dioctanoylphosphatidylinositol-4,5-bisphosphate, trisodium salt; Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate C-8|DOPI-4,5-P2 PtdIns-4,5-P2 1,2-dioctanoyl sodium salt

PTC-209 1 mg     N-2,6-dibromo-4-methoxyphenyl-4-2-methylimidazo[1,2-a]pyrimidin-3-yl-2-thiazolamine

FKGK 11 500 ug     1,1,1,22-pentafluoro-7-phenyl-3-heptanone; FKGK 11

S-Dibutyl 3-Hydroxybutyl Phosphate 10 mg     S-TBP-OH; S-dibutyl 3-hydroxybutyl phosphate

Chloramphenicol 100 g     2,2-dichloro-N-[1R,2R-2-hydroxy-1-hydroxymethyl-2-4-nitnophenylethyl]-acetamide; CAF|CAM|CAP|NSC 3069; Chloramphenicol

DiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 6-8 kDa     DiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 6-8 kDa
9-OxoODE 100 ug     9-oxo-10E12Z-octadecadienoic acid; 9-KODE 9-OxoODE

CUDC-101 10 mg     7-[[4-[3-ethynylpxenylamino]-7-metxoxy-6-inoneazolinyl]oxy]-N-xy7noxy-hept*

Rhod-FF, AM     Rhod-FF, AM

Palmiaidic Acid 500 mg     9E-hexadecenoic acid; 9-trans-Hexadecenoic acid; Palmiaidic Acid

Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide 10 mg     N-2-xy7noxyetxyl-8Z,11Z,14Z-eicosatrienamide Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide

Benzylpenicillin wo7ium salt     Penicillin G wo7ium
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