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甲酰胺,PCR 級5mL保存

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更新時間:2017-07-17 13:02:17瀏覽次數(shù):327次

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甲酰胺,PCR 級5mL保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

甲酰胺,PCR 5mL保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
甲酰胺,PCR 5mL保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
甲酰胺,PCR 5mL保存DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
甲酰胺,PCR 5mL保存詳細(xì)說明書:

甲酰胺,PCR 5mL保存使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin E2 10 mg     9,15-dioxo-11。alpha-hydroxy-prost-5Z-en-1-oic acid; 13,14-dihydro-15-keto PGE2 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin E2

Desmethylene Paroxetine hydrochloride 10 mg     4-[[3S,4R-4-4-fluorophenyl-3-piperidinyl]methoxy]-1,2-benzenediol, monohydrochloride

五水流二氫鉀(500GM     potewwium Phosphate Monobasic, Anhydrous, 8--8; 99%

4Z),7Z),10Z),13Z-Hexadecatetraenoic Acid-d5 1 mg     4Z7Z10Z13Z-hexadeca-4,71013-tetraenoic-15,15’,1616,16-d5 acid; 4Z),7Z),10Z),13Z-Hexadecatetraenoic Acid-d5

Angelis Salt 50 mg     disodium diazen-1-ium-12,2-triolate; Sodium α-oxyhyponitnite; Angelis Salt

DJM-166; DJM-2-166     PX-866
PRIMA-1 5 mg     2,2-bishydroxymethyl-3-quinuclidinone; PRIMA-1

PPQ-102 5 mg     6,7-dihydro-7,9-dimethyl-6-5-methyl-2-furanyl-11-phenyl-Pyrimido[4,5:3,4]pyrrolo[1,2-a]quinoxaline-8,105H,9-dione

FKGK 11 10 mg     1,11,22-pentafluoro-7-phenyl-3-heptanone; FKGK 11

5-fluoro ADB-PINACA 50 mg     N-1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl-1-5-fluoropentyl-1H-indazole-3-carboxamide

Phenylmethylsulfonyl fluoride 25 g     benzenemethanesulfonyl fluoride; PMSF|NSC 88499|Benzylsulfonyl fluoride; Phenylmethylsulfonyl fluoride

DiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 6-8 kDa     DiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 6-8 kDa
9-OxoODE 25 ug     9-oxo-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9-KODE; 9-OxoODE

PF-04620110 25 mg     trans-4-[4-4-amino-7,8-dixy7no-5-oxopyrimido[5,4-f][1,4]oxazepin-65H-ylpxenyl]-cyclohexaneacetic acid

Rhod-FF, 三鈉鹽     Rhod-FF, tripotewwium salt

Palmiaidic Acid 100 mg     9E-hexadecenoic acid; 9-trans-Hexadecenoic acid Palmiaidic Acid

Dihomo-γ-Linolenic Acid 50 mg     8Z,11Z14Z-eicosatrienoic acid; DGLA; Dihomo-γ-Linolenic Acid

Pen-Strep solution     EZSolution Penicillin/Streptomycin Sterile-Filtered 100X
TAT肉湯250g用于化妝品和藥品中微生物檢測

乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 250(g) incubation media 乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 250(g)

葡萄糖肉浸液肉湯 Dextrose Meat Infusion Broth 250 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)

葡萄糖銨培養(yǎng)基250用于志賀氏菌的葡萄糖銨試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia葡萄糖銨培養(yǎng)基250用于志賀氏菌的葡萄糖銨試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

BPL瓊脂 250g 用于食品中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)
麥芽汁瓊脂250g用于霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)

Preston 選擇性添加物 4/ incubation media Preston 選擇性添加物 4/

沙門氏菌顯色培養(yǎng)基配套平皿 Salmonella Chromogenic Medium Dish 9/

雙歧桿菌BS培養(yǎng)基250用于雙歧桿菌分離培養(yǎng)incubationmedia雙歧桿菌BS培養(yǎng)基250用于雙歧桿菌分離培養(yǎng)

四環(huán)素檢定瓊脂 250g 用于四環(huán)素殘留的微生物學(xué)檢定(SN標(biāo)準(zhǔn))
甲酰胺,PCR 5mL保存Camp-BAPAgarBase,Modified

BCPMediumwith0.2%SolubleStarch

TPY瓊脂培養(yǎng)基 TPY medium 250 用于雙歧桿菌分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))

LPM瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于李斯特氏菌選擇性分離,每培養(yǎng)基中添加incubationmediaLPM瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于李斯特氏菌選擇性分離,每培養(yǎng)基中添加1414

Amies*管 20/ 用于致病菌標(biāo)本的運(yùn)送保存

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