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MnCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL運(yùn)輸

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更新時(shí)間:2017-07-17 12:59:49瀏覽次數(shù):169次

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MnCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL運(yùn)輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

MnCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門(mén)為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
MnCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
MnCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
MnCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL運(yùn)輸詳細(xì)說(shuō)明書(shū):

MnCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL運(yùn)輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin E2 1 mg     915-dioxo-11。alpha。-hydroxy-prost-5Z-en-1-oic acid; 13,14-dihydro-15-keto PGE2; 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin E2

Desmethyldoxepin hydrochloride 5 mg     Nordoxin 3-dibenz[b,e]oxepin-116H-ylidene-N-methyl-1-propanamine, monohydrochloride

五水流二氫鉀(2.5KG     potewwium Phosphate Monobasic, Anhydrous, 8--8; 99%

4Z),7Z),10Z),13Z),16Z-Nonadecapentaenoic Acid-d5 500 ug     4Z,7Z10Z,13Z,16Z-nonadeca-4,7,10,13,16-pentaenoic-18,18’,19,1919-d5 acid; 4Z),7Z),10Z),13Z),16Z-Nonadecapentaenoic Acid-d5

Angelis Salt 5 mg     disodium diazen-1-ium-1,22-triolate; Sodium α-oxyhyponitnite; Angelis Salt

DJM-166 DJM-2-166     PX-866
PRIMA-1 10 mg     2,2-bishydroxymethyl-3-quinuclidinone PRIMA-1

PPQ-102 10 mg     6,7-dihydro-7,9-dimethyl-6-5-methyl-2-furanyl-11-phenyl-Pyrimido[4,5:3,4]pyrrolo[1,2-a]quinoxaline-8,105H,9-dione

FKGK 11 1 mg     1,1,12,2-pentafluoro-7-phenyl-3-heptanone FKGK 11

5-fluoro ADB-PINACA 25 mg     N-1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl-1-5-fluoropentyl-1H-indazole-3-carboxamide

Phenylmethylsulfonyl fluoride 10 g     benzenemethanesulfonyl fluoride; PMSF|NSC 88499|Benzylsulfonyl fluoride; Phenylmethylsulfonyl fluoride

DiaEasy Dialyzer (15 ml) MWCO 6-8 kDa     DiaEasy Dialyzer (15 ml) MWCO 6-8 kDa
9S-HODE cholesteryl ester 100 ug     9S-xy7noxy-10E,12Z-octadecadienoic acid, cholesteryl ester; 9S-HODE cholesteryl ester

PF-04620110 10 mg     trans-4-[4-4-amino-7,8-dixy7no-5-oxopyrimido[5,4-f][1,4]oxazepin-65H-ylpxenyl]-cyclohexaneacetic acid

Rhod-FF, 三鈉鹽     Rhod-FF, tripotewwium salt

Palmiaidic Acid metxyl ester 500 mg     9E-hexadecenoic acid metxyl ester; 9-trans-Hexadecenoic acid metxyl ester; Palmiaidic Acid metxyl ester

Dihomo-γ-Linolenic Acid 100 mg     8Z11Z,14Z-eicosatrienoic acid; DGLA; Dihomo-γ-Linolenic Acid

D-     EZSolution Chlorampxenicol, Sterile-Filtered
綠膿菌素測(cè)定培養(yǎng)基(PDP)250g用于綠膿桿菌的綠膿菌素測(cè)定試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 1000(g) incubation media 乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 1000(g)

馬鈴薯瓊脂 Potato Agar 250 霉菌、酵母菌的培養(yǎng)、鑒定

葡萄糖半固體培養(yǎng)基250用于志賀氏菌的復(fù)合生化試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia葡萄糖半固體培養(yǎng)基250用于志賀氏菌的復(fù)合生化試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

BPLAgar
ITC肉湯250g用于耶爾森氏菌的選擇性培養(yǎng)增菌

SIM培養(yǎng)基 Hydrogen Sulfide Indole Motility Medium 用于硫化氫、動(dòng)力、吲哚試驗(yàn)

脫氧鵝膽酸 CDCA 5 BR,98%

雙歧桿菌BS培養(yǎng)基250g/瓶用于雙歧桿菌的分離培養(yǎng)incubationmedia雙歧桿菌BS培養(yǎng)基250g/瓶用于雙歧桿菌的分離培養(yǎng)

HeartInfusionAgar
MnCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL運(yùn)輸en80-CornMeatAgarMediun

BCYE瓊脂基礎(chǔ) 100(g) incubation media BCYE瓊脂基礎(chǔ) 100(g)

碘附 Iodophor 500 炭疽桿菌檢測(cè)用配套試劑

普通肉湯培養(yǎng)基250用于*的增菌培養(yǎng)(SN、GB標(biāo)準(zhǔn)),也可用于消毒效果測(cè)定incubationmedia普通肉湯培養(yǎng)基250用于*的增菌培養(yǎng)(SNGB標(biāo)準(zhǔn)),也可用于消毒效果測(cè)定

*雙水解酶試驗(yàn)用培養(yǎng)基(AD) 5g 生化培養(yǎng)基,用于弧菌的*試驗(yàn)

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