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NO清除劑(NO Scavenger)5ml實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-07-07 13:04:49瀏覽次數(shù):888次

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公司供應(yīng)的NO清除劑(NO Scavenger)5ml實(shí)驗(yàn)方法品種類(lèi)齊全,檢測(cè)效果好,質(zhì)量保證,歡迎廣大科研用戶(hù)!

NO清除劑(NO Scavenger5ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
NO清除劑(NO Scavenger5ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀(guān)察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀(guān)察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀(guān)察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
NO清除劑(NO Scavenger5ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer
PC-3M-IE8(人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株) 5×106cells/瓶×2

腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

CD36 Others Rat 大鼠 CD36 / SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HASMC細(xì)胞,人大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 小鼠自發(fā)高癌細(xì)胞,TA2細(xì)胞 人虹膜色素上皮細(xì)胞cDNAHIPEpiC cDNA

大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTE

DH82(犬巨噬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0214SK-N-SH(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24
CL-0259BC-020(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

FAM171B Others Human FAM171B / KIAA1946 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人顱骨造骨細(xì)胞cDNAHCO cDNA

豬腎細(xì)胞;PK(15) 骨髓瘤細(xì)胞,FO細(xì)胞 G422細(xì)胞,KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株

表達(dá)SV40TEBNA1的人胚腎細(xì)胞;293ET

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人肺成纖維細(xì)胞 (HPF)( 5×105 )

人皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-HSF-1

CL-0277HCC94(人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化))5×106cells/瓶×2

人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292 大鼠表皮黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

MFC 小鼠胃癌細(xì)胞

TFRC Others Human TFRC / CD71 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠羧甲基賴(lài)酸(CML)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人突觸泡蛋白抗體(SYP-Ab)免疫試劑盒 Human anti-synaptophysin antibody,SYP-Ab ELISA kit

植物組織果糖含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50/48

RatsolubleInterleukin2recepter,IL-2sRELISA試劑盒大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanintrinsicfactorantibody,IFAELISA試劑盒人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanMyosinMYSELISAKit人肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human vasopeptidase inhibitors (VPI) ELISA Kit 人血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒

HumanAnti-phosphatidylserineantibody,APSAELISAKit 人抗磷脂酰*抗體(APSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanEpinephrine/Adrenaline,EPIELISA試劑盒人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織PRK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20

Humanp53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKitP53(P53)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
NO清除劑(NO Scavenger5ml實(shí)驗(yàn)方法人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人白介素15(IL-15)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人白介素13(IL-13)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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