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更新時間:2017-07-07 13:04:49瀏覽次數(shù):854次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)NO清除劑(NO Scavenger)5ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
NO清除劑(NO Scavenger)5ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
NO清除劑(NO Scavenger)5ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
PC-3M-IE8(人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞株) 5×106cells/瓶×2
腸粘膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CD36 Others Rat 大鼠 CD36 / SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照)
HASMC細胞,人大動脈平滑肌細胞 小鼠自發(fā)高癌細胞,TA2細胞 人虹膜色素上皮細胞cDNAHIPEpiC cDNA
大鼠氣管上皮細胞;RTE
DH82(犬巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0214SK-N-SH(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24
CL-0259BC-020(人癌細胞)5×106cells/瓶×2
FAM171B Others Human 人 FAM171B / KIAA1946 人細胞裂解液 (陽性對照)
人顱骨造骨細胞cDNAHCO cDNA
豬腎細胞;PK(15) 骨髓瘤細胞,FO細胞 G422細胞,KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細胞瘤瘤株
表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肺成纖維細胞 (HPF)( 5×105 )
人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1
CL-0277HCC94(人子宮鱗癌細胞(高分化))5×106cells/瓶×2
人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292 大鼠表皮黑色素細胞*培養(yǎng)基 100mL
MFC 小鼠胃癌細胞
TFRC Others Human 人 TFRC / CD71 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠羧甲基賴酸(CML)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人突觸泡蛋白抗體(SYP-Ab)免疫試劑盒 Human anti-synaptophysin antibody,SYP-Ab ELISA kit
植物組織果糖含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatsolubleInterleukin2recepter,IL-2sRELISA試劑盒大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanintrinsicfactorantibody,IFAELISA試劑盒人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanMyosin,MYSELISAKit人肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vasopeptidase inhibitors (VPI) ELISA Kit 人血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒
HumanAnti-phosphatidylserineantibody,APSAELISAKit 人抗磷脂酰*抗體(APSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
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組織PRK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanp53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit人P53(P53)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
NO清除劑(NO Scavenger)5ml實驗方法人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素15(IL-15)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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