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更新時間:2017-07-07 13:04:06瀏覽次數(shù):594次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)NO誘導劑(NO Inducer)5ml免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
NO誘導劑(NO Inducer)5ml免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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PC-3M-2B4(人前列腺癌低轉移細胞株) 5×106cells/瓶×2
大隱靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CD36 Others Rat 大鼠 CD36 / SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照)
OKT3細胞,總T淋巴細胞 小鼠β胰島素瘤細胞,RIN-m5F細胞 人心肌細胞-cDNAHCM-a cDNA
Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256
Daudi(人淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0206SGC7901(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細胞;CHO
CM-H021人前列腺平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
FAM171B Others Human 人 FAM171B / KIAA1946 人細胞裂解液 (陽性對照)
主動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
293001A細胞,Sars蛋白表達株 人癌細胞,MDA-MB-436細胞 雪旺細胞培養(yǎng)基SCM-prf
白牦牛皮膚細胞;Yak-2
IL35 Others Human 人 IL-35 (IL12A & IL27B) 人細胞裂解液 (陽性對照)
CFHR1 Others Human 人 CFHR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎胰腺組織來源細胞;CCC-HPE-2
SD大鼠骨髓間質(zhì)干細胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells
MV3細胞,人黑色素瘤細胞 嗜酸乳桿菌 人骨肉瘤細胞;HOS
WI38/VA13(SV-40Z轉化肺成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2
J82(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2 LncaP, 人前列腺癌細胞 人腦瘤細胞;SF763
小鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA試劑盒 ,英文名: BSA ELISA Kit
人褪黑素(MT)ELISA檢測試劑盒HumanMelatonin,MISAKit 96T/48T
大鼠載脂蛋白C-I(APOC1)免疫試劑盒 Rat apolipoprotein C-I,APOC1 ELISA kit
英文名稱HumanE-CadherinELISAKit人E-鈣粘附分子(E-Cadherin)規(guī)格:96T/48T
動物組織總ATP酶(totalATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitAβ1-40兔β淀粉樣蛋白1-40規(guī)格:48T/96T
兔子凋亡誘導因子(AIF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vasoactive intestinal peptide (VIP) ELISA Kit 人血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒
Humananti-teichoicacidantibody,TAELISAKit 人抗磷壁酸抗體(TA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanepidermalkeratin,EKELISA試劑盒人表皮角蛋白(EK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織PRAK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
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NO誘導劑(NO Inducer)5ml免費代測人白介素1β轉換酶(ICE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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