當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞氧化應(yīng)激>> 過氧亞硝基陰離子(ONOO-)檢測試劑盒100T售后服務(wù)
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更新時間:2017-07-07 12:59:05瀏覽次數(shù):193次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)過氧亞硝基陰離子(ONOO-)檢測試劑盒100T售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
過氧亞硝基陰離子(ONOO-)檢測試劑盒100T售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
過氧亞硝基陰離子(ONOO-)檢測試劑盒100T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
NCI-H524(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
角膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
BB7.2細(xì)胞, 分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞 大鼠肉瘤細(xì)胞,WK256細(xì)胞 人臍動脈平滑肌細(xì)胞裂解物HUASMCL
敘利亞倉鼠細(xì)胞系;Syrian Hamster AV12
CHO-K1(倉鼠卵巢細(xì)胞亞株) 5×106cells/瓶×2 CL-0126JAR(人胎盤絨毛膜癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8
人間充質(zhì)干細(xì)胞(骨髓)cDNAHMSC-bm cDNA
FAP Others Human 人 FAP / Seprase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HEPG2.2.15 肝癌細(xì)胞HBV病毒株
CL-0290MDA-MB-468(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
RLF, 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞
雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7 人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
SCN2B Others Human 人 SCN2B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞;HES
C57BL/6小鼠胚胎干細(xì)胞 C57BL/6 mouse embryonic stem cells
RPMI-8226細(xì)胞,人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌 SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T1
TT(人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細(xì)胞 人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞;293 Ad5
小鼠膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)ELISA試劑盒 ,英文名: ANXA5 ELISA Kit
人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA檢測試劑盒HumandeoxyribonucleaseⅠ,DNase-ⅠELISAKit 96T/48T
大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)免疫試劑盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA kit
英文名稱Human25-HVDELISAKit人25-羥基維生素D(25-HVD)規(guī)格:96T/48T
糞便副傷*B(SalmonellaParatyphiB)定性基因檢測試劑盒20次
ELISAKitTRANCE人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子規(guī)格:48T/96T
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human thymidine phosphorylase (TP) ELISA Kit 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA試劑盒
HumanAnti-glucoprotein210,GP210ELISAKit 人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humaneosinophilcationicprotein,ECPELISA試劑盒人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織PKCι激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanparamyxovirusparotitisIgMELISAKit人腮腺炎病毒IgMELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
過氧亞硝基陰離子(ONOO-)檢測試劑盒100T售后服務(wù)人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白細(xì)胞介素4受體(IL-4R)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白細(xì)胞介素25(IL-25)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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