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冰凍切片活性氧(ROS)檢測試劑盒100T實驗方法

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更新時間:2017-07-07 12:57:17瀏覽次數(shù):235次

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冰凍切片活性氧(ROS)檢測試劑盒100T實驗方法NCI-H2452(人間皮瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

CNPY2 Others Human CNPY2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

BJAB細(xì)胞,人B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系 KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株,B22細(xì)胞 人前列腺成纖維細(xì)胞裂解物HPrFL

豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL1

CCL-149(大鼠肺泡上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0086GNM(人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT

冰凍切片活性氧(ROS)檢測試劑盒100T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
冰凍切片活性氧(ROS)檢測試劑盒100T實驗方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
冰凍切片活性氧(ROS)檢測試劑盒100T實驗方法實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補加200μL1×Binding Buffer
間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM

FCAR Others Rat 大鼠 FCAR / CD89 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

GHS1 金黃地鼠皮膚成纖維細(xì)胞

CM-M022小鼠甲狀腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

LX-2, 人肝星形細(xì)胞株

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906 人內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
NTRK1 Others Canine TrkA / NTRK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人胚胎,皮膚,肌肉;M-7

CM-H001人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SW620細(xì)胞,人結(jié)腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,HSC1細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0905

HBZY-1(大鼠腎小球系膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

ASGR1 Others Mouse 小鼠 ASGPR1 / ASGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人脫氧皮質(zhì)酮(DOC)免疫試劑盒 Human Deoxycorticosterone,DOC ELISA Kit

蔗糖磷酸合成酶(SPS)測試盒 可見分光光度法 50/48

Ratsolubleclusterofdifferentiation14,sCD14ELISA試劑盒大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanInterleukin5,IL-5ELISA試劑盒人白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

humanmyeloiddifferentiationprimaryresponsegene88,MYD88ELISAKit人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88(MYD88)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human thymus leukemia antigen (TLa) ELISA Kit 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA試劑盒

Humanpurkinjecellautoantibody,PCA-1/YoELISAKit 人抗浦肯野細(xì)胞抗體/Yo抗體(PCA-1/Yo)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humanEndothelin1,ET-1ELISA試劑盒人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織PKCδ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

Humanparathyroidhormone-likeprotein,PLPELISAKit人甲狀旁腺激素樣蛋白(PLP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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