組織活性氧（ROS）檢測試劑盒100T免費代測使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
組織活性氧（ROS）檢測試劑盒100T免費代測操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
組織活性氧（ROS）檢測試劑盒100T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
NCI-H23(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2

腦微血管內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

THBD Others Rat 大鼠 Thrombomodulin / THBD 人細胞裂解液 (陽性對照)

Raji細胞，人Burkitt`s淋巴瘤細胞 C57小鼠黑色素瘤瘤株,ME細胞 人腎近曲小管上皮細胞裂解物HRPTEpiCL

犬腎細胞;MDCK(NBL-2)

CCD-1095Sk(人浸潤性導管癌旁皮膚細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0078EL4(小鼠淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠網織細胞性白血病瘤株;L615
人神經元RNAHN miRNA5 μg

FCER1A Others Human 人 FcERI / FCER1A 人細胞裂解液 (陽性對照)

人冠狀動脈內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

3T3NIH細胞，小鼠成纖維細胞 HUVEC(人臍靜脈血管內皮細胞) 小鼠垂體瘤細胞;GT1-1

CSF1 Protein Mouse 重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標簽)

Tca-8113(人舌鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 野生型人c-kit受體細胞株;A7d
PPARG Others Human 人 PPARG / Nr1c3 / PPARgamma 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人胚胎，皮膚，肌肉;M-22

興國鯉尾鰭細胞;XGL

NAMALWA細胞，Burkitt's 淋巴瘤細胞 細胞,KB-C1.5細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0903

615小鼠肺癌瘤株;HP615

TNFRSF10B Others Human 人 TNFRSF10B / TRAILR2 / CD262 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠糖皮質激素受體β(GR-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人拓樸異構酶Ⅱ(TopoⅡ)免疫試劑盒 Human type Ⅱ topoisomerase,TopoⅡ ELISA Kit

蔗糖合成酶(SS)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣

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HumanInterleukin4,IL-4ELISA試劑盒人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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