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更新時間:2017-07-07 13:12:12瀏覽次數(shù):276次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)*氨基轉移酶(ALT)檢測試劑盒100T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
*氨基轉移酶(ALT)檢測試劑盒100T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
NCI-H205(人腎上腺腺瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
原代內皮細胞特制基礎培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml
SLC3A2 Others Rat 大鼠 SLC3A2 / CD98 人細胞裂解液 (陽性對照)
HuT 78細胞,人T細胞白血病細胞 小鼠漿細胞瘤,MPC-11細胞 上皮細胞培養(yǎng)基MEpiCM-prf
幼蚊細胞;C6/36
BIU-87(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M030小鼠腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL 人急性單核細胞白血病細胞;THP-1
人上皮細胞HMEpiC
FCGR2B Others Rat 大鼠 CD32b / FCGR2B 人細胞裂解液 (陽性對照)
HFL1 人肺成纖維細胞
CM-R043大鼠小腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
U251人膠質瘤細胞
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;HH-29 人腦膜細胞*培養(yǎng)基 100mL
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA
CM-H017人上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
Loo細胞,人結腸癌細胞 人黑色素瘤細胞,HS-6細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞(拉祜族);KM9406
Hacat(人永生化角質形成細胞) 5×106cells/瓶×2
CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒 ,英文名: Aβ1-42 ELISA Kit
人微管相關蛋白2(MAP-2)ELISA檢測試劑盒Humanmicrotubule-associatedprotein2,MAP-2ELISAKit 96T/48T
大鼠*Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒 Rat coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit
英文名稱RatT4ELISAKit大鼠甲狀腺素(T4)規(guī)格:96T/48T
酵母多酚氧化酶(polyphenoloxidase;PPO)活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitMT人褪黑素規(guī)格:48T/96T
兔子腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human adenosine deaminase (ADA) ELISA Kit 人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒
HumanFructose-1,6-bisphosphatealdolase,FDAELISAKit 人果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
humandopamine,DAELISA試劑盒人多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織NLK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanphosphatidylserine,PSELISAKit人磷脂酰*(PS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
*氨基轉移酶(ALT)檢測試劑盒100T使用說明書人單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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