當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞氧化應(yīng)激>> β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)檢測試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法
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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)NO清除劑(NO Scavenger)5ml實(shí)驗(yàn)方法
NO誘導(dǎo)劑(NO Inducer)5ml免費(fèi)代測
二氧化氮(NO2)檢測試劑盒200T實(shí)驗(yàn)方法
β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)檢測試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法NCI-H1688(人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
原代心肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml
IL12B Others Rat 大鼠 IL12B / IL-12B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
KG-1細(xì)胞,人白血病細(xì)胞 小鼠子細(xì)胞,U14細(xì)胞 滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基SM-prf
CM-H016人呼吸道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
BGC823(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M014小鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人急性早幼粒白血病細(xì)胞;HL-60
β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)檢測試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)檢測試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)檢測試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
淋巴成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
FCGR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD16 / FCGR3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
LX-2 人肝星形細(xì)胞
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1
HCT116, 人結(jié)直腸癌細(xì)胞
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFa 大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17
CL-0306SMC-1(人胸膜瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
A673細(xì)胞,橫紋肌癌細(xì)胞 人巨核細(xì)胞保白血病細(xì)胞,Dami細(xì)胞 人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞;NTERA-2
293T(人胚腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
PVR Others Mouse 小鼠 CD155 / PVR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人微管相關(guān)蛋白tau(MAPT)抗體免疫試劑盒 Human microtubule-associated protein tau (MAPT) antibody ELISA kit
血清游離*(FC)含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatProteinPhosphatase,PPELISA試劑盒大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin10,IL-10ELISA試劑盒人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanMothersagainstdecapentaplegichomolog7,Smad7ELISAKit人Smad7ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子*受體(TR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat fibrinogen degradation product (FDP) ELISA Kit 大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒
Humananti-perinuclearfactor,APFELISAKit 人抗核周因子抗體(APF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumandopamineD2receptor,D2RELISA試劑盒人多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織NEK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanphosphoenolpyruvatecarboxykinase,PCKELISAKit人磷酸烯醇式丙同酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)檢測試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法人蛋白S(ProteinS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人蛋白C(ProteinC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人彈性蛋白(Elastin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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